克隆必须采用活的生物体作为复制遗传物质的载体，而PCR（聚合酶链反应）可以摆脱这种活体依赖性。本书对当代重大生物技术PCR进行了系统全面的描绘，介绍了PCR的基本原理、PCR的重要应用，以及PCR技术在实际操作中的方法与技巧，并例举了PCR技术中常见的问题。

本书分为三篇，原理篇简要介绍PCR基本原理、技术发展及重要应用；操作方法/技术篇按照由简单到复杂的顺序，依次详细地介绍各种主流PCR技术在实际操作中的方法与技巧；常见问题解答篇采用一问一答的方式，根据编写人员的实践经验，对PCR技术中常见的问题进行详细解答。内容涉及：常规PCR、反转录PCR、实时荧光定量PCR、免疫PCR、利用PCR构建突变体、未知序列的克隆、其他常见PCR技术和PCR软件的使用。

与同类书相比，本书更加以实际经验为基础，突出实际操作技巧,采取Step-by-Step方式进行说明，使方法与技巧更易于掌握。

本书适用于医药、生命科学相关实验室的技术人员及相关研究堂。

原理篇

第1章 PCR技术基本原理

 1.1 基本原理

 1.2 PCR反应动力学

 1.3 PCR技术的特点

 1.4 PCR反应体系的组成

 1.5 PCR所需设备和器材

 参考文献

第2章 PCR技术的发展

 2.1 PCR新技术的发展

 2.2 其他核酸扩增技术的发展

 参考文献

第3章 PCR技术在医学研究领域中的应用

 3.1 PCR在医学检验中的应用

 3.2 对PCR技术医学应用的正确认识

 3.3 PCR技术在医学应用中的管理

 参考文献

操作方法/技术篇

第4章 常规PCR

 4.1 常规PCR反应体系说明

 4.2 PCR操作

 4.3 PCR条件优化

 参考文献

第5章 反转录PCR

 5.1 RTPCR原理

 5.2 RNA的提取和纯化

 5.3 RTPCR的操作

 5.4 衍生技术——基因表达系列分析

 参考文献

第6章 实时荧光定量PCR

 6.1 原理

 6.2 实验操作与优化

 6.3 实时定量PCR数据分析

 6.4 qPCR的常用软件——Primer Express

 6.5 qPCR仪的选择

 参考文献

第7章 免疫PCR

 7.1 原理

 7.2 实验操作

 7.3 条件优化

 参考文献

第8章 利用PCR构建突变体

 8.1 定点突变

 8.2 随机诱变PCR

 8.3 衍生技术

 参考文献

第9章 未知序列的克隆

 9.1 RNA连接酶介导的cDNA 5′末端快速扩增

 9.2 单侧特异性引物扩增未知DNA序列

 9.3 反向PCR

 参考文献

第10章 其他医学领域常见PCR技术

 10.1 PCR技术应用于病原微生物检测鉴定

 10.2 遗传性疾病诊断的常用PCR技术

 10.3 PCR技术在肿瘤方面的应用

 10.4 甲基化特异性PCR

 参考文献

第11章 PCR软件使用

 11.1 Oligo 6的使用

 11.2 PerlPrimer的使用

 11.3 引物在线设计

常见问题解答

附录

附录1 临床基因扩增检验实验室管理暂行办法

附录2 临床基因扩增检验实验室基本设置标准

附录3 临床基因扩增检验实验室工作规范