《蛋白质纯化指南(原书第2版)》主编为美国威斯康星大学麦迪逊分校的R.R.伯吉斯博士和迈阿密大学医学院的M.P.多伊彻博士,编著者包括70多位国外蛋白质科学领域的著名学者。全书共12部分44章,内容囊括了与蛋白质科学相关的克隆、表达、纯化、鉴定、检测等各方面的经典方法及最新技术,是一本全面和实用的蛋白质纯化技术工具书。本书不仅对从事蛋白质科学研究的科技工作者和研究生有较大指导意义,对于生命科学其他领域的研究者也有很大的参考价值。因此,科学出版社与军事医学科学院生物工程研究所携手将其原著第二版译为中文并出版。
本书为《蛋白质纯化指南》(Guide to Protein Purification)第二版的中文译本。原著由来自于美、德、英、澳等国家著名大学、科研机构或生物技术公司的70多位蛋白质科学领域内的知名专家撰写,对蛋白质纯化相关的技术、材料、试剂、设备等进行了详细介绍。第二版由。Elsevier出版集团于2009年出版,对1990年第一版问世以后该领域出现的各种新的技术和方法着重阐述。全书12部分44章,包括建立蛋白质纯化程序,常用技术,重组蛋白质的表达纯化,提取物和亚细胞组分的分离,详细纯化步骤(批量法、层析法、亲和法、电泳法),膜蛋白和糖蛋白的纯化,纯化蛋白质的特性等内容。
《蛋白质纯化指南(原书第2版)》既有对实验方案的详细描述,又有对各种实验方案的原理解释和分析探讨,具有操作规范、要点突出、分析透彻、可行性强的特点,是一本非常实用的蛋白质纯化技术工具书。本书既可供从事蛋白质科学研究的科技工作者和研究生作为实验操作指南,也可供生命科学其他领域的研究者作为参考用书。本书主编为美国威斯康星大学麦迪逊分校的R.R.伯吉斯博士和迈阿密大学医学院的M.P.多伊彻博士。
译者的话
前言
撰稿人
第1章序言
第1章 为什么要纯化酶?
第1部分 制定纯化流程
第2章 蛋白质纯化的策略与考虑因素
1.总则
2.蛋白质来源
3.制备提取物
4.大批量纯化步骤
5.纯化的精纯过程
6.结论
参考文献
第3章 生物信息学在蛋白质纯化设计中的应用
1.氨基酸序列中的重要信息
2.无法从序列中预知的信息
3.结论
参考文献
第4章 准备纯化工作简表
1.引言
2.脚注的重要性
3.SDS-PAGE对分析主要蛋白质分离组分的价值
4.一些常见的错误和问题
第2部分 操作蛋白质和酶的常规方法
第5章 建立一个实验室
1.配套材料
2.检测和分析的必要条件
3.蛋白质分级分离的必要条件
第6章 缓冲液:原理和实践
1.引言
2.理论
3.缓冲液的选择
4.缓冲液的制备
5.挥发性缓冲液
6.广谱缓冲液
7.缓冲液储存液的配方
参考文献
第7章 酶活性的测定
1.引言
2.催化活性的原理
3.酶活性的检测
4.反应分析混合物的组成
5.讨论
参考文献
第8章 蛋白质定量
1.引言
2.试剂配制的一般性指导
3.紫外吸收光谱分析
4.基于染料的蛋白质分析方法
5.考马斯亮蓝蛋白质浓度分析法(范围:1~50 μg)
6.碱性铜还原分析法(范围:5~100 μg)
7.二喹啉酸法(范围:0.2~50 μg)
8.胺衍生法(范围:0.05~25μg)
9.基于去污剂的荧光检测(范围:0.02~2μg)
10.总论
参考文献
第9章 蛋白质浓缩和溶质的去除
1.层析
2.电泳
3.透析
4.超滤
5.冷冻干燥
6.沉淀
7.结晶
参考文献
第10章 蛋白质稳定性的保持
1.蛋白质失活的原因
2.常规处理方法
……
第3部分 重组蛋白的表达与纯化
第4部分 提取物和亚细胞组分的制备
第5部分 纯化程序:量产法
第6部分 纯化程序:层析方法
第7部分 纯化程序:亲和法
第8部分 纯化方法:电泳法
第9部分 膜蛋白和糖蛋白的纯化程序
第10部分 纯化蛋白质的特性
第11部分 其他技术
第12部分 结束语
索引
图版