由兰蓉主编的《细胞培养(修订版)》以普通高等教育“十一五”国家级规化教材《细胞培养技术》为基础，融入“工学结合”的办学思路，聘请一批企业一线专家参与教材建设，开发企业真正用得上的教学内容，充分体现项目教学、行为引导式教学、任务驱动式教学等现代教法和学法。

教材中的项目均取材于企业(或行业)的真实工作任务，包括CHO细胞的培养、CHO细胞的冻存和复苏、鸡胚成纤维细胞的培养、VERO细胞的大规模培养、抗人血白蛋白杂交瘤细胞系的建立、胡萝卜悬浮细胞系的建立。每个项目都附有与之配套的实训音像资料，时长约1小时，为教材使用者的自主学习提供了方便。

由兰蓉主编的《细胞培养(修订版)》为国家示范性高职院校一线教师和企业专家共同开发的教改成果教材。《细胞培养(修订版)》打破传统的学科体系，以项目为载体，让学生在完成项目的过程中学习知识，训练技能，提升职业综合素质。《细胞培养(修订版)》中的项目主要取材于企业(或行业)的真实工作任务，包括CHO细胞的培养、CHO细胞的冻存和复苏、鸡胚成纤维细胞的培养、VERO细胞的大规模培养、抗人血白蛋白杂交瘤细胞系的建立、胡萝卜悬浮细胞系的建立。每个项目都附有与之配套的实训音像资料。

《细胞培养(修订版)》适合高职高专院校生物技术相关专业的学生使用，也可供有关技术人员参考。

项目一 CHO细胞的培养1

 项目介绍1

 项目实施2

任务一 CHO细胞培养前的准备2

一、培养用品的准备2

二、培养用液的配制6

任务二 CHO细胞的传代10

任务三 CHO细胞培养的常规检查11

 项目思考13

 项目知识链接13

项目必备知识13

一、动物细胞培养的概念13

二、培养细胞的生长类型和形态特征14

三、培养前的准备16

四、动物细胞传代培养技术32

五、培养细胞的观察和检测技术34

项目拓展知识39

一、动物细胞培养发展史39

二、动物细胞培养的应用42

三、动物细胞培养工作的基本要求和工作方法43

四、培养细胞分化状态的变化44

五、培养细胞的生长特点45

六、培养细胞的生长和增殖过程47

七、培养细胞的生长条件49

八、动物细胞培养实验室52

 理论难点自测56

项目二 CHO细胞的冻存和复苏58

 项目介绍58

 项目实施58

任务一 CHO细胞的冻存58

任务二 CHO细胞的复苏59

任务三 CHO细胞的活性检查60

一、染色法60

二、四唑盐(MTT)比色法62

 项目思考63

 项目知识链接63

项目必备知识63

一、细胞的冻存63

二、细胞的复苏64

三、细胞活性检查65

四、细胞计数65

项目拓展知识66

一、细胞的运输66

二、骨髓瘤细胞的冻存66

三、细胞冻存的注意事项67

 理论难点自测67

项目三 鸡胚成纤维细胞的培养68

 项目介绍68

 项目实施68

任务一 组织块法培养鸡胚成纤维细胞68

任务二 消化法培养鸡胚成纤维细胞70

 项目思考72

 项目知识链接72

项目必备知识72

一、组织块培养法72

二、消化培养法74

项目拓展知识74

一、不同组织的取材74

二、组织材料的分离75

三、上皮细胞培养77

四、神经细胞培养79

五、肿瘤细胞培养80

 理论难点自测84

项目四 VERO细胞的大规模培养86

 项目介绍86

 项目实施87

 项目思考88

 项目知识链接88

项目必备知识88

一、动物细胞大规模培养技术概述88

二、动物细胞大规模培养的方法89

项目拓展知识95

一、动物细胞大规模培养技术的应用95

二、动物细胞生物反应器95

三、大规模培养技术的操作方式100

 理论难点自测101

项目五 抗人血白蛋白杂交瘤细胞系

的建立103

 项目介绍103

 项目实施104

任务一 人血白蛋白免疫小鼠的准备104

任务二 骨髓瘤细胞和脾细胞的融合104

一、主要试剂的配制104

二、操作过程105

任务三 抗人血白蛋白杂交瘤细胞

的筛选108

一、试剂的配制108

二、可溶性抗原的酶联免疫

吸附试验(ELISA)109

任务四 抗人血白蛋白杂交瘤细胞的

克隆培养109

一、有限稀释法109

二、软琼脂法110

任务五 杂交瘤细胞的冻存和复苏110

一、杂交瘤细胞的冻存110

二、杂交瘤细胞的复苏111

 项目思考111

 项目知识链接111

项目必备知识111

一、单克隆抗体的概念111

二、杂交瘤技术制备单克隆抗体的基本原理111

三、杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要过程112

项目拓展知识117

一、杂交瘤技术的诞生117

二、单克隆抗体的大量制备和纯化117

三、细胞的基因转染技术118

 理论难点自测121

项目六 胡萝卜悬浮细胞系的建立122

 项目介绍122

 项目实施123

任务一 MS培养基的制备123

一、MS培养基母液的配制和保存123

二、MS培养基的配制和灭菌124

三、配制记录125

任务二 胡萝卜愈伤组织的诱导126

任务三 胡萝卜细胞的悬浮培养127

 项目思考127

 项目知识链接128

项目必备知识128

一、植物组织与细胞培养128

二、植物细胞培养的培养基131

三、外植体的选择和预处理137

四、植物愈伤组织培养的一般程序139

五、植物细胞的悬浮培养139

六、植物细胞培养的环境条件141

项目拓展知识143

一、植物细胞培养的发展史143

二、植物细胞培养的应用145

三、植物细胞培养的实验室条件147

四、植物细胞的固定化培养152

五、单细胞培养153

六、原生质体培养156

七、植物细胞的大规模培养161

 理论难点自测169

附录1 常用设备标准操作规程172

 一、三洋MCO-15AC型二氧化碳培养箱标准操作规程172

 二、SZ-93的双重纯水蒸馏器标准操作规程173

 三、37XB型倒置显微镜标准操作规程173

 四、高压灭菌锅标准操作规程174

 五、超净工作台标准操作规程174

 六、电热接种灭菌器标准操作规程174

 七、气浴恒温振荡器标准操作规程174

附录2 细胞培养技术常用术语中

英文对照175

参考文献179