本书试图避免过多原理方面的介绍，又力求克服纯粹描述试验步骤的缺点，其特点是实用性和可行性。在实验方法的选择上尽可能选用常见的和我们实践过的方法，力求使读者按本书介绍的方法操作即可开展工作并获得满意结果。

本书分为四个部分，第一部分介绍免疫学常用技术，第二部分介绍如何利用生物信息学进行免疫学研究，第三部分介绍免疫学研究中常用的分子生物学技术，第四部分介绍信号转导常用研究技术。本书尽量介绍常用可行的方法。有些地方为了方法的连续性，难免有所重复。

迄今，免疫学技术已广泛应用到生命科学研究的各个领域。本书涵盖了目前常用的常规免疫学技术方法、分子生物学方法、生物信息学分析方法以及信号转导研究常用的方法。除了简单介绍各个常用实验技术的基本原理，还根据作者长年的工作经验，在关键方法或步骤中提供了注意事项，归纳和阐述了具体实验中可能遭遇的问题和困惑，并对实验失败的原因给予了分析。

本书适用于已经开始或正计划使用免疫学技术进行实验研究的本科生、研究生、科研工作者以及临床检验工作者。

第一部分 常用免疫学技术

第一章 蛋白质分析与纯化

 第一节 蛋白质浓度测定

一、Bradford法

二、Lowry法测蛋白质含量

三、紫外吸收法测蛋白质含量

 第二节 蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳

 第三节 Western印迹

 第四节 蛋白质纯化

 第五节 离子交换层析

 第六节 亲和层析

一、谷胱甘肽亲和层析

二、金属螯合亲和层析

三、Protein A、Protein G亲和层析

 第七节 疏水作用层析

 参考文献

第二章 抗体制备技术

 第一节 多克隆抗体的制备

 双向免疫扩散法测定抗血清效价

 第二节 单克隆抗体的制备

一、动物免疫

二、细胞融合技术

三、杂交瘤细胞克隆化

四、单抗亚类测定

五、单克隆抗体的大量制备

 参考文献

第三章 抗体纯化和标记技术

 第一节 抗体的纯化

一、IgG的纯化

二、IgM的纯化

 第二节 抗体片段的制备

一、IgG片段的纯化

二、IgM片段的纯化

 第三节 放射性同位素标记抗体技术

一、氯胺T法

二、Iodogen法

 第四节 荧光素标记抗体技术

 第五节 酶标记抗体技术

 第六节 生物素标记抗体技术

 第七节 铕标记抗体技术

 第八节 胶体金标记抗体技术

 参考文献

第四章 免疫检测技术

 第一节 免疫荧光技术

 间接细胞免疫荧光技术

 第二节 酶免疫技术

一、双抗体夹心法检测抗原

二、间接法测定抗体

三、竞争法

 第三节 放射免疫技术

一、放射免疫分析

二、免疫放射分析

 第四节 化学发光免疫分析技术

 化学发光酶联免疫分析

 参考文献

第五章 免疫细胞分离技术

 第一节 密度梯度分离技术

 第二节 黏附分离技术

 第三节 磁珠分离技术

 第四节 流式细胞仪分离技术

 参考文献

第六章 细胞功能检测

 第一节 细胞增殖试验

 第二节 吞噬试验

 第三节 细胞黏附试验

 第四节 抗体依赖的细胞毒试验

 第五节 补体介导的细胞毒试验

 第六节 凋亡检测

一、细胞凋亡的形态学检测

二、磷脂酰丝氨酸外翻分析

三、线粒体膜势能的检测

四、DNA片段化检测

五、Caspases活性的检测

第七章 免疫组织化学和免疫电镜

 第一节 免疫组织化学

 第二节 免疫电镜

 参考文献

第八章 细胞因子及其活性的检测

 第一节 ELISA法定量检测细胞因子

 第二节 ELISPOT法检测细胞因子分泌细胞

 第三节 流式细胞仪检测细胞内细胞因子

 第四节 细胞因子依赖细胞株检测细胞 因子活性

MTT比色分析法

 参考文献

第二部分 与分子免疫学有关的生物信息学

第九章 生物信息学简介

第十章 核酸与蛋白质数据库

 第一节 核酸数据库

一、子数据库及其命名

二、核酸序列数据库格式

三、核酸数据库的检索

 第二节 蛋白质序列数据库

一、蛋白质序列数据库简介

二、蛋白质序列数据库的检索

 第三节 蛋白质结构数据库

一、PDB数据库检索

二、PDB数据库格式

第十一章 序列比对分析

 第一节 两序列比对分析

一、两序列对比分析

二、序列两两比对的数据库相似性检索 分析

 第二节 多序列比对分析

第十二章 核酸与蛋白质结构预测

 第一节 核酸结构预测

一、核酸序列的一级结构及翻译

二、密码子偏好性分析

三、RNA二级结构预测

 第二节 蛋白质序列分析

一、蛋白质一级序列分析

二、蛋白质序列的反向翻译

 第三节 蛋白质二级结构及其预测

一、蛋白质二级结构

二、蛋白质二级结构预测

 第四节 蛋白质空间结构预测及常用在线 预测方法

一、蛋白质空间结构预测

二、常用在线预测方法

三、常用在线预测方法实例

第十三章 蛋白质相互作用理论模拟

第十四章 抗原表位预测

第十五章 免疫信息学

一、IMGT数据库

二、KABAT数据库

三、dbMHC

四、AntiJen

五、SYFPEITHI

六、HDB

七、MHCBN

八、BCIPEP

第十六章 免疫学相关重要Web网站的 简介

 参考文献

第三部分 分子生物学技术

第十七章 基本分子生物学技术

 第一节 质粒DNA的分离、纯化和 鉴定

 第二节 DNA酶切及凝胶电泳

 第三节 大肠杆菌感受态细胞的制备和 转化

 第四节 RNA的提取和cDNA合成

 第五节 重组质粒的连接、转化及筛选

 第六节 基因组DNA的提取

一、细菌基因组DNA的制备

二、基因组DNA的检测

 参考文献

第十八章 PCR技术

 第一节 PCR克隆基因

 第二节 PCR法进行基因突变

 第三节 PCR法全合成新基因

 参考文献

第十九章 分子文库的构建及筛选

 第一节 cDNA文库的构建及筛选

 第二节 噬菌体展示文库的构建及筛选

 参考文献

第二十章 分子杂交技术

 第一节 核酸探针以及制备方法

一、双链DNA探针及其标记方法

二、单链DNA探针

三、末端标记DNA探针

四、寡核苷酸探针

五、RNA探针

六、几种常见的非同位素标记探针的 方法

 第二节 几种常见的杂交

一、Southern杂交

二、Northern杂交

三、菌落原位杂交

四、斑点杂交

 第三节 杂交反应的条件及参数的优化

 参考文献

第二十一章 RNAi技术

 参考文献

第四部分 信号转导常用研究技术

第二十二章 信号转导蛋白的活化水平 分析

 第一节 免疫细胞化学

 第二节 激酶活性测定

 第三节 凝胶阻滞电泳

 参考文献

第二十三章 第二信使含量测定

 第一节 Ca2+测定

 第二节 IP3的测定

 第三节 cAMP的测定

 参考文献

第二十四章 亚细胞定位分析

 第一节 细胞分步分离法

 第二节 免疫荧光结合激光共聚焦显微镜 分析

 参考文献

第二十五章 蛋白蛋白相互作用分析

 第一节 免疫共沉淀检测蛋白蛋白相互 作用

 第二节 GST pull down

 第三节 采用GFP和荧光共振能量转移 技术测定蛋白质相互作用

 第四节 酵母双杂交

 参考文献

第二十六章 蛋白DNA相互作用分析

 第一节 CHIP Assay

 第二节 报道分子测定

 参考文献

第二十七章 磷酸化多肽双向作图和磷酸 氨基酸分析

 第一节 磷酸化多肽双向作图

 第二节 磷酸氨基酸分析

 参考文献

第二十八章 蛋白质组学的双向电泳与 生物质谱

 第一节 双向电泳技术

 第二节 生物质谱技术

 考马斯亮蓝染色的胶内酶切

 参考文献