本书是“普通高等教育‘十一五’规划教材”之一,该书是在《生物化学实验指导》讲义基础上对原教材内容进行了修改并进行了补充。生物化学实验技术不仅是生物化学的重要内容和理论基础,也是生物科学研究的重要方法和手段。该书实验和附录两个部分,其中着重介绍了39个综合性、实用性强的生物类实验,并增设了“自行设计实验”和“综合性开放实验”。阅读该书,可为学生的专业课学习以及生产、科研工作打下良好基础。
《生物化学实验》由实验和附录两部分组成。实验部分着重介绍了39个综合性、实用性强的生物类实验,分为三部分:基础实验、综合性必做实验及综合性选做实验。另外增设了自行设计实验和综合性开放实验,以鼓励和培养学生自己动手、开发创新的精神。在附录中,整理和翻译了有关常用仪器性能指标及使用说明、缓冲溶液的配制、植物样品的采集、处理及保存等内容,为从事综合性的生物化学实验的师生们提供方便。
本教材可供理工科高等院校的生命科学、生物技术、生物工程等专业及农林院校的农学、林学、植保、资环、园艺,食品、理学等专业的学生及相关领域的科技人员使用。
前言
实验室规则
实验记录及实验报告
基础实验
实验一 分光光度计线性分辨范围测定
实验二 缓冲液配制和pH值测定
实验三 荧光光度法测定核黄素的含量
综合性必做实验
实验四 3,5-二硝基水杨酸比色法测定糖的含量
实验五 RNA的提取与核酸的颜色反应
实验六 影响淀粉酶活性的一些因素
实验七 硫酸铵沉降法纯化蛋白质
实验八 葡聚糖凝胶层析脱盐
实验九 淀粉酶活力的测定
实验十 Folin-酚比色法测定蛋白质含量
实验十一 茚三酮比色法测定赖氨酸含量
实验十二 考马斯亮蓝G-250比色法测定蛋白质含量
实验十三 2,6-二氯酚靛酚滴定法测定L抗坏血酸的含量
实验十四 间隔法测定过氧化物酶的活力
实验十五 连续记录法测定过氧化氢酶的活力
实验十六 纸电泳分离鉴定三种腺苷酸
综合性选做实验
实验十七 斐林-碘量滴定法测定糖的含量
实验十八 血糖的定量测定(Folin-Malrnros法)
实验十九 残余法测定粗脂肪的含量
实验二十 对二甲基氨基苯甲醛比色法测定色氨酸含量
实验二十一 凯氏定氮法测定蛋白质含量
实验二十二 DNA与RNA的提取分离及颜色反应
实验二十三 紫外吸收法测定核酸的含量
实验二十四 钼酸铵比色法测定L-抗坏血酸的含量
实验二十五 硫酸铵分级沉淀及透析脱盐纯化过氧化氢酶
实验二十六 紫外分光光度法测定蛋白酶活力
实验二十七 鸡卵类黏蛋白的制备
实验二十八 质粒的提取和电泳检测
实验二十九 几丁质酶提取与Western杂交
实验三十 脂肪酶的活力测定
实验三十一 离子交换柱层析分离氨基酸
实验三十二 吸附柱层析分离β-胡萝卜素
实验三十三 纸层析研究植物体内的转氨基作用
实验三十四 硅胶G薄层层析分离可溶性糖
实验三十五 连续的聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳
实验三十六 不连续聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳
实验三十七 血清总胆固醇的测定
实验三十八 维生素A的提取及含量测定
实验三十九 从牛奶中分离制备酪蛋白
实验四十 工业淀粉酶的纯化与分析(自行设计实验)
综合性开放实验
参考实验项目
附录
附录一 植物样品的采取、处理与保存
附录二 常用缓冲溶液的配制
附录三 硫酸铵溶液饱和度计算表(0℃)
附录四 色谱显色剂
附录五 常用凝胶及层析过滤的规格和性能
附录六 玻璃仪器的洗涤及一些常用洗涤剂
附录七 移液器的使用
附录八 分光光度计
附录九 离心机
附录十 电泳设备
附录十一 pH计
附录十二 电子天平
附录十三 实验室安全及防护知识