本书的主要内容是如何利用基因工程手段,对乳酸菌质粒的复制子进行分离和鉴定,并得到带有复制子的最小酶切片段,进而得到适用于构建乳酸菌表达载体的复制子。适合从事乳酸菌遗传改造方向的研究人员参考阅读。
乳酸菌在发酵、农业、食品、生物加工以及医药等方面有着重要应用,国外早已开展了对乳酸菌遗传学的研究。通过基因工程手段改造的乳酸菌可以用于发酵乳和其他食品,并且工业中可作为用于生产肽、酶或代谢物的宿主菌。
本书的主要内容就是利用基因工程手段,对乳酸菌质粒的复制子进行分离和鉴定,并得到带有复制子的最小酶切片段,将来用于构建乳酸菌表达载体进而改造乳酸菌。
本书适合从事乳酸菌遗传改造方向的研究人员参考阅读。
1 绪论
1.1 乳酸菌的分类与鉴定
1.2 乳酸菌质粒
1.3 质粒消除
1.4 乳酸菌基因表达载体
小结
2 复制检测载体的构建
2.1 质粒pAT110的制备
2.2 质粒pUC19的制备
2.3 载体的构建
小结
3 乳酸菌复制子质粒来源的筛选
3.1 乳酸菌质粒小量提取
3.2 乳酸菌KLDS 6.0718菌种鉴定
小结
4 质粒pEV105特性鉴定
4.1 KLDS 6.0718菌株内源性质粒数量的鉴定
4.2 pEV105酶切位点的鉴定
4.3 质粒消除
4.4 质粒复制机制分析
小结
5 pEV105质粒复制子最小片段的研究
5.1 pEV105质粒复制子最小片段的确定
5.2 pEV105质粒最小复制子片段序列分析
小结
参考文献
附录
附录Ⅰ 菌株和质粒
附录Ⅱ 培养基配制表
附录Ⅲ 试剂配制表
附录Ⅳ 溶液配制表