本教材依据免疫产品生产和免疫检验相关岗位对免疫技术技能的要求，结合高职高专基于工作过程的课程体系改革的实践，从实际产品和技术出发，形成“适度、够用”的系统理论知识。

全书共分十个项目，主要内容包括：大肠杆菌E.coli抗原的制备，免疫血清的制备，凝集反应检测ABO血型，沉淀反应检测血清效价，荧光免疫检测猪瘟病毒等。

本书为国家示范性高职院校一线教师和企业专家共同开发的教改成果教材。全书打破免疫技术的传统学科体系，依据免疫产品生产和免疫检验相关岗位对免疫技术技能的要求，结合高职高专基于工作过程的课程体系改革的实践，从实际产品和技术出发，重构教学内容。全书按照由简单到复杂、由单项到综合的层次设计了十个项目，并分为三个平台。第一个平台为基础研究平台，包括免疫技术基础技能训练、大肠杆菌E.coli抗原的制备、免疫血清的制备三个项目，讲述免疫技术必备的基础知识和基础技能。第二个平台为免疫检测平台，包括凝集反应检测ABO血型、沉淀反应检测血清效价、酶联免疫吸附试验检测植物病毒、荧光免疫检测猪瘟病毒四个项目，讲述免疫检验技术。第三个平台为免疫技术产品平台，包括鸡胚流感疫苗的制备、人体免疫球蛋白的制备、金标免疫诊断试剂盒的制备三个项目，讲述免疫技术产品的制备。

本教材可供高职高专生物技术类相关专业学生使用，也可供相关企业技术人员参考。

项目一 免疫技术基础技能训练1

 一、项目介绍1

 二、学习目标1

 三、项目实施1

任务（一）识别人体免疫器官和免疫细胞发育过程1

任务（二）动物注射和采集血液3

任务（三）分离T淋巴细胞、B淋巴细胞6

 四、项目思考7

 五、必备知识8

 （一）免疫技术简介8

 （二）免疫学和免疫8

 （三）免疫学发展简史9

 （四）免疫系统11

 六、拓展知识14

 （一）动物注射前编号和标记14

 （二）动物捉拿固定16

 （三）常用实验动物给药法17

 （四）注射器的准备与消毒19

 （五）动物血液采集方法19

项目二 大肠杆菌E.coli抗原的制备21

 一、项目介绍21

 二、学习目标21

 三、项目实施21

任务（一）大肠杆菌E.coli外膜蛋白OMP抗原的制备21

任务（二）大肠杆菌E.coli脂多糖LPS的制备22

 四、项目思考24

 五、必备知识25

 （一）抗原的含义25

 （二）抗原免疫原性和特异性26

 （三）影响抗原免疫应答的因素28

 （四）抗原的分类29

 （五）超抗原30

 （六）免疫佐剂31

 六、拓展知识32

 （一）可溶性抗原的制备及鉴定32

 （二）细胞性免疫原的制备35

项目三 免疫血清的制备36

 一、项目介绍36

 二、学习目标36

 三、项目实施36

任务（一）抗伤寒杆菌血清的制备36

任务（二）抗绵羊红细胞血清的制备（溶血素的制备）38

任务（三）抗人血清抗体的制备39

 四、项目思考39

 五、必备知识40

（一）抗体、抗血清与免疫球蛋白40

（二）免疫球蛋白的结构40

（三）抗体的生物学功能45

（四）五类免疫球蛋白的特性和功能46

 六、拓展知识47

（一）免疫球蛋白基因的结构和抗体多样性47

（二）制备抗血清中关键步骤相关知识50

（三)人类免疫球蛋白的主要理化性质和生物学特性比较52

（四)免疫应答52

（五)免疫耐受54

项目四 凝集反应检测ABO血型56

 一、项目介绍56

 二、学习目标56

 三、项目实施56

任务（一）ABO血型鉴定56

任务（二）玻片凝集反应检测未知细菌57

任务（三）布氏杆菌病平板凝集反应58

 四、项目思考59

 五、必备知识60

（一）抗原抗体反应60

（二）凝集反应的概念与特点64

（三）凝集反应的类型64

 六、拓展知识66

（一)血型相关基本概念66

（二)红细胞凝集和致敏的原理66

（三)红细胞血型67

（四)血小板血型67

（五)输血相关免疫检验68

（六)输血不良反应69

项目五 沉淀反应检测血清效价71

 一、项目介绍71

 二、学习目标71

 三、项目实施71

任务（一）环状沉淀反应测定血清效价71

任务（二）单向琼脂扩散检测人血清中的免疫球蛋白72

任务（三）双向琼脂扩散试验73

 四、项目思考75

 五、必备知识75

（一）沉淀反应75

（二）液相沉淀试验76

（三）凝胶沉淀反应78

（四）免疫电泳技术80

 六、拓展知识82

（一）对流免疫电泳实验82

（二）免疫电泳实验检测抗原83

（三）火箭电泳实验检测抗原84

项目六 酶联免疫吸附试验检测植物病毒85

 一、项目介绍85

 二、学习目标85

 三、项目实施85

任务（一）酶标抗体（抗原）的制备85

任务（二）双抗体夹心法诊断植物病毒86

 四、项目思考88

 五、必备知识89

（一）酶免疫分析技术89

（二）酶免疫标记技术的方法90

 六、拓展知识93

（一）免疫标记技术93

（二）过氧化物酶-抗过氧化物复合物制备技术93

（三）McAb-PAP制备技术94

（四）碱性磷酸酶标记抗体制备技术94

（五）碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶复合物制备技术95

项目七 荧光免疫检测猪瘟病毒96

 一、项目介绍96

 二、学习目标96

 三、项目实施96

任务（一）直接免疫荧光法测抗原96

任务（二）间接免疫荧光法测抗体97

任务（三）荧光抗体法诊断猪瘟98

 四、项目思考99

 五、必备知识100

（一）荧光免疫技术的定义及分类100

（二）荧光免疫标记技术材料准备100

（三）荧光免疫检测直接法101

（四）荧光免疫检测间接法101

 六、拓展知识102

（一）荧光免疫检测补体结合法102

（二）荧光免疫检测双标记法103

（三）荧光免疫标记技术应用103

（四）化学发光免疫标记技术103

项目八 鸡胚流感疫苗的制备105

 一、项目介绍105

 二、学习目标105

 三、项目实施105

总任务 鸡胚流感疫苗的制备105

 四、项目思考107

 五、必备知识109

（一）病毒类疫苗的定义及分类109

（二）病毒培养方法109

（三）常用的病毒检测方法109

（四）病毒类疫苗的生产过程110

（五）常用病毒类疫苗112

 六、拓展知识113

（一）其他流感灭活疫苗113

（二）人工主动免疫113

（三）细菌类疫苗的定义及分类114

（四）细菌类疫苗的生产过程115

（五）多糖类疫苗生产116

项目九 人体免疫球蛋白的制备119

 一、项目介绍119

 二、学习目标119

 三、项目实施119

任务（一）Cohn法制备人体免疫球蛋白119

任务（二）牛血清免疫球蛋白的提取121

 四、项目思考122

 五、必备知识124

（一）血液制品124

（二）人工被动免疫124

（三）计划免疫124

（四）免疫球蛋白的制备125

 六、拓展知识126

项目十 金标免疫诊断试剂盒的制备127

 一、项目介绍127

 二、学习目标127

 三、项目实施127

任务（一）胶体金的制备127

任务（二）胶体金标记蛋白的制备129

任务（三）胶体金诊断试剂盒的制备130

 四、项目思考131

 五、必备知识132

（一）金标记免疫分析基本概念132

（二）斑点金免疫色谱试验132

 六、拓展知识133

（一）斑点金免疫渗滤试验133

（二）其他诊断试剂盒134

（三）酶联免疫吸附诊断试剂盒生产工艺134

（四）PCR诊断试剂生产工艺134

附录一 2010年《中华人民共和国药典》对人免疫球蛋白的规定136

 冻干静注人免疫球蛋白(pH 4)136

 人免疫球蛋白139

附录二 2010年《中华人民共和国药典》对典型抗血清的规定142

 抗狂犬病血清142

 抗人T细胞兔免疫球蛋白144

 抗人T细胞猪免疫球蛋白148

 抗炭疽血清151

 抗五步蛇毒血清154

附录三 2010年《中华人民共和国药典》对典型细菌疫苗的规定157

 A群脑膜炎球菌多糖疫苗157

 A群脑膜炎球菌多糖疫苗使用说明160

附录四 2010年《中华人民共和国药典》对典型病毒疫苗的规定163

 冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)163

 冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)使用说明167

参考文献170