本书以银杏不同生长时期韧皮部薄壁组织超微结构的解剖学研究为突破口,应用酶标免疫光镜细胞化学定位技术和胶体金免疫电镜细胞化学定位技术,结合组织化学和生物化学分析,对银杏营养贮藏蛋白质进行准确定位;阐明银杏营养贮藏蛋白质季节性动态变化规律;确定营养贮藏蛋白质组分;掌握营养贮藏蛋白质与银杏生长发育的相关性;探索营养贮藏蛋白质积累、转移和再利用的环境及生理要求;揭示银杏营养贮藏蛋白质的形成、积累和降解机理。这对于提高银杏氮素养分利用率,指导适时合理施肥以及今后采用转基因技术培育高氮素利用率的优良品种等方面均具有重大理论价值和实践意义。
第一章 导论
1 木本植物营养贮藏蛋白质研究进展/1
1.1 木本植物营养贮藏蛋白质的基本特征/2
1.2 木本植物营养贮藏蛋白质的生化特性/10
1.3 木本植物营养贮藏蛋白质的生理功能/14
1.4 营养贮藏蛋白质的积累与降解机理/17
1.5 木本植物营养贮藏蛋白质研究展望/25
2 蛋白质组学及其在农林业研究中的应用/28
2.1 蛋白质组学研究进展/28
2.2 蛋白质组学在林业研究中的应用/30
2.3 蛋白质组学在农业研究中的应用/35
2.4 林木蛋白质组学研究展望/40
3 立题依据、研究目的及意义/41
第二章 银杏营养贮藏蛋白质的细胞学研究
1 引言/43
2 材料与方法/44
2.1 研究材料/44
2.2 采样方法/44
2.3 光镜样品的制作/44
2.4 电镜样品的制作/45
3 结果与分析/45
3.1 银杏的年生长周期/45
3.2 银杏显微结构分析/46
3.3 银杏超微结构分析/57
4 结论与讨论/67
4.1 银杏的贮藏蛋白质细胞属于杨树型/68
4.2 银杏营养贮藏蛋白质在植株中的分布/68
4.3 营养贮藏蛋白质的积累/69
4.4 银杏营养贮藏蛋白质的动用/70
第三章 银杏营养贮藏蛋白质生物化学性质研究
1 引言/73
2 材料与方法/74
2.1 研究材料/74
2.2 采样方法/74
2.3 试剂/75
2.4 可溶性蛋白质干粉的制备/77
2.5 可溶性蛋白质含量的测定/78
2.6 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳/79
2.7 双向凝胶电泳/80
2.8 SDS-聚丙烯酰胺凝胶的过碘酸-Schiff(17AS)试剂染色/82
3 结果与分析/83
3.1 银杏不同部位可溶性蛋白质含量的动态变化/83
3.2 银杏不同部位营养贮藏蛋白质的单向电泳分析/88
3.3 银杏营养贮藏蛋白质的双向电泳分析/95
3.4 银杏营养贮藏蛋白质的糖蛋白性质的分析/100
4 结论与讨论/105
4.1 银杏不同部位可溶性蛋白质含量的差异/105
4.2 银杏营养贮藏蛋白质组分的确定/106
4.3 银杏不同部位营养贮藏蛋白质具有明显的季节变化规律/108
4.4 双向电泳方法的探讨/109
4.5 银杏营养贮藏蛋白质具有糖蛋白质的性质/110
4.6 凝胶不同染色方法的比较/113
第四章 银杏营养贮藏蛋白质的免疫化学特性研究
1 引言/114
2 材料与方法/115
2.1 研究材料/115
2.2 采样方法/115
2.3 试剂/115
2.4 银杏营养贮藏蛋白质抗血清的制备/118
2.5 银杏32kDa和36kDa两种蛋白质免疫印迹/123
2.6 酶标免疫光镜定位/125
2.7 胶体金免疫电镜定位/126
3 结果与分析/127
3.1 银杏营养贮藏蛋白质抗体制备的分析/127
3.2 银杏营养贮藏蛋白质的免疫印迹分析/133
3.3 银杏营养贮藏蛋白质免疫组织化学定位分析/139
4 结论与讨论/142
4.1 银杏营养贮藏蛋白质抗体获得/142
4.2 银杏36kDa和32kDa营养贮藏蛋白质组分的确定/144
第五章 总结论
1 主要研究结论/147
1.1 银杏营养贮藏蛋白质的细胞学研究/147
1.2 银杏营养贮藏蛋白质的生化性质的研究/148
1.3 银杏营养贮藏蛋白质的免疫组织化学定位研究/150
1.4 银杏营养贮藏蛋白质组分的确定/151
2 本研究的创新与特色/152
参考文献/153