本书是作者总结了复旦大学微生物学课程50余年的教学经验编写而成。共安排实验104个,其中包括76个基础实验和28个任选实验,既重视对基本操作的全面训练,,又关注到对学生研究能力、综合能力和实验兴趣的培养。内容涵盖了显微镜技术,各类微生物的形态观察,培养基配制,消毒与灭菌,生长繁殖的测定,菌种的分离、培养、鉴定和保藏,厌氧菌培养,遗传与变异,病毒与免疫基本技术,以及与食品、发酵、环境、土壤和杀虫菌等有关的应用微生物学实验。其中有不少内容为作者独创或改进,可操作性强,富有特色。全书具有内容丰富、取材新颖、体系科学、特色鲜明和易教易学等优点。可用作综合性大学、师范院校和其他高校的生物科学、生物技术、环境科学以及食品、发酵和农林等专业的微生物学实验教材。
本教材共安排了104个实验,包括76个基础实验和28个任选实验,内容比第1版丰富得多。其中有不少实验是我们通过原创或革新等措施而成,形成了一批设计巧妙、条件简单、易于掌握和便于推广的特色实验,如四大类微生物菌落的识别、真菌单孢子分离、乳酸菌和双歧杆菌的简便快速计数法、厌氧菌的针筒培养法、根霉的假根观察、用侧臂试管测定细菌的生长曲线以及改良的霉菌载片培养、划线分离技术和芽孢染色法等。通过讲解和学习这类自创实验,不仅可活跃教学气氛和提高学习效果,还可激发同学创新欲望和培养他们的创新能力。
实验须知
实验常用器皿一览表
第一部分 基础实验
第一周 环境微生物的检测和菌落
识别
实验1-1-1环境中微生物的检测
实验1-1-2斜面接种与培养
实验1-l-3三点接种与培养
实验1—1-4四大类微生物菌落形态的识别
第二周 细菌染色法和光学显微镜的使用
实验1-2-1普通光学显微镜的使用
实验1-2-2细菌的涂片及简单染色法
实验1-2-3革兰氏染色法(经典法)
实验1-2-4革兰氏染色法(三步法)
实验1-2-5显微测微尺的使用
第三周 细菌的芽孢、荚膜染色法
实验1-3-1芽孢染色法
实验1-3-2荚膜染色法
实验1-3-3相差显微镜的使用
第四周 鞭毛染色法和细菌运动的观察
实验1-4-1鞭毛染色法
实验1-4-2穿刺接种法和细菌运动力的观察
实验1-4-3用悬滴法观察细菌的运动
实验1-4-4用暗视野显微镜观察细菌的运动
第五周 放线菌和真菌的培养与形态观察
实验1-5-1放线菌的插片、搭片培养和形态观察
实验1-5-2放线菌的玻璃纸培养和形态观察
实验1-5-3真菌的载片培养和形态观察
第六周 真菌若干特殊构造的观察
实验1-6-1根霉孢子囊和假根的观察
实验1-6-2根霉接合孢子囊的形成和观察
实验1-6-3酵母菌子囊孢子的形成和观察
实验1-6-4蓝色犁头霉接合孢子囊的形成和观察
实验1-6-5霉菌子囊壳、子囊和子囊孢子的观察
第七周 培养基的配制、分装和灭菌
实验1-7-1通用培养基的配制
实验1-7-2鉴别性培养基的配制
实验1-7-3选择性培养基的配制
实验1-7-4加压蒸汽灭菌法
实验1-7-5培养皿的干热灭菌法
实验1-7-6过滤除菌技术
第八周 微生物生长量的测定和生长曲线的绘制
实验1-8-1细菌的液体接种法和培养特征的观察
实验1-8-2细菌生长曲线的测定
实验1-8-3用干重比色法测定微生物的生长量
第九周 微生物的显微镜直接计数法
实验1-9-1酵母菌和霉菌孢子的直接计数法
实验1-9-2细菌细胞的直接计数法
第十周 微生物的间接计数法
实验1-10-1平板菌落计数法
实验1-10-2乳酸菌和双歧杆菌的简便快速计数法
实验1-10-3用MPN法测定活性污泥中的硝化细菌数
第十一周 微生物的纯种分离法
实验1-11-1用平板划线法分离菌种
实验1-11-2用浇注平板法和涂布平板法分离菌种
实验1-11-3真菌的单孢子分离法
实验1-11-4真菌的菌丝尖端切割分离法
第十二周 检测噬菌体的基本实验技术
实验1-12-1大肠埃希氏菌噬菌体的分离和纯化
实验1-12-2噬菌体效价的测定
实验1-12-3溶源性细菌的检测和鉴定
第十三周 厌氧菌的培养技术
实验1-13-1厌氧罐技术
实验1-13-2用厌氧袋法分离培养丙酮丁醇梭菌
实验1-13-3针筒厌氧培养法
第十四周 微生物的遗传变异实验
实验1-14-1紫外线对细菌的诱变作用
实验1-14-2紫外线对枯草芽孢杆菌产生淀粉酶的诱变效应
实验1-14-3用梯度平板法筛选大肠埃希氏菌抗药性突变株
实验1-14-4大肠埃希氏菌营养缺陷型突变株的筛选
实验1-14-5艾姆斯(Ames)试验法
实验1-14-6细菌原生质体的制备和融合
实验1-14-7酵母菌原生质体的制备和融合
第十五周 物理、化学因素对微生物生长的影响
实验1-15-1温度、pH和渗透压对微生物生长的影响
实验1-15-2紫外线的杀菌作用
实验1-15-3微波的杀菌作用
实验1-15-4消毒剂和杀菌剂最低抑制浓度(M1C)的测定
实验1-15-5用杯碟法测定抗生素的效价
第十六周 菌种的保藏原理与方法
实验1-16-1常用的简易保藏法
实验1-16-2甘油保藏法
实验1-16-3干燥保藏法
实验1-16-4冷冻真空干燥保藏法
实验1-16-5液氮超低温保藏法
第十七周 细菌鉴定中的常规和微量快速生理生化反应
实验1-17-1若干常规生理生化反应
实验1-17-2鉴定细菌的微量、快速生化试验
实验1-17-3应用AP1-20E细菌鉴定系
鉴定肠杆菌科和部分其他革兰氏阴性杆菌
实验1-17-4应用SWF(A)细菌鉴定系统鉴定发酵性革兰氏阴性杆菌
第十八周 血清学反应和巨噬细胞功能的测定
实验1-18-1免疫血清的制备
实验1-18-2凝集反应
实验1-18-3环状沉淀试验
实验1-18-4用鲎试剂法测定细菌内毒素
实验1-18-5双向琼脂扩散沉淀反应
实验1-18-6火箭免疫电泳
实验1-18-7 巨噬细胞吞噬功能的测定
第二部分 任选实验
实验Ⅱ-1 利用选择性培养基分离固氮菌、酵母菌和土壤真菌.
实验Ⅱ-2酸奶的制作和其中乳酸菌的分离
实验Ⅱ-3泡菜的制作和其中乳酸菌的分离
实验Ⅱ-4甜酒酿的制作及酒药中根霉的分离
实验Ⅱ-5拮抗性放线菌的筛选法
实验Ⅱ-6用琼脂块法筛选抗生菌
实验Ⅱ-7杀虫细菌——苏云金芽孢杆菌的分离
实验Ⅱ-8杀虫真菌——白僵菌的分离
实验Ⅱ-9酚降解细菌的分离、纯化和筛选
实验Ⅱ-10用亨盖特滚管技术分离严格厌氧菌
实验Ⅱ-11 食用菌菌种的分离和制种技7R
实验Ⅱ-12植物病毒的接种、培养和定量测定
实验Ⅱ-13 TMV的免疫血清制备和效价测定
实验Ⅱ-14动物病毒的鸡胚接种、培养和病毒滴度测定
实验Ⅱ-15家蚕质型多角体病毒的培养和分离提纯
实验Ⅱ-16微生物细胞的固定化及其应用
实验Ⅱ-17水中细菌总数的测定
实验Ⅱ-18水中大肠菌群的检测
实验Ⅱ-19五日生化需氧量(BOD5)的测定
实验Ⅱ-20微生物传感器法测定BOD值
实验Ⅱ-21 极端嗜盐菌甘油二醚类衍生物的测定
实验Ⅱ-22细菌DNA中(G+C)mol%的测定
实验Ⅱ-23质粒DNA转化酵母细胞
实验Ⅱ-24酵母原生质体的DNA转化
实验Ⅱ-25非中断杂交与基因定位
实验Ⅱ-26大肠埃希氏菌A噬菌体的高频转导
实验Ⅱ-27大肠埃希氏菌口一半乳糖苷酶的诱导合成及其调控
实验Ⅱ-28台式自控发酵罐的原理、构造和使用
附 录
一、若干微生物的学名及其发音
二、酸碱指示剂的配制
三、常用培养基成分
四、染色液和试剂的配制
五、蒸汽压力与温度的关系
六、培养基容积与加压灭菌所需时间
七、缓冲液的配制表
八、常用消毒剂表
九、市售浓酸和氨水的相对密度和实际浓度
十、相对密度与糖度换算表
十一、常用干燥剂
十二、十进制倍数和分数的词冠表(国际制)
十三、常用的计量单位
十四、洗液的配制
十五、标准筛孔对照表
十六、部分国家的菌种保藏机构名称和网址信息