本书主要针对在国内外临床实验室最具使用前景及目前使用最广泛的实时荧光PCR技术，从PCR技术的历史、发展和趋势，实时荧光PCR技术的特点，临床PCR实验室的设计及质量管理体系的建立，用于PCR检验的临床标本的采集运送和保存，临床PCR实验室的仪器设备的使用、维护和校准，临床PCR检验的数据处理和质量保证以及主要临床PCR检验项目的特点、临床意义及注意细节等进行了论述，以期为从事临床PCR检验的实验室技术人员提供参考性建议。

本书系统阐述了实时荧光PCR技术的基础理论和临床检测方法，共25章。包括实时荧光PCR技术的基本原理和方法，PCR技术的基本原理和方法，PCR实验室设计与质量管理，检验标本的采集、运送、保存及核酸提取，PCR测定数据处理，PCR检验仪器设备，检验质量保证，病毒核酸检测的标准物质，以及各型肝炎病毒、人免疫缺陷病毒-1、人乳头瘤病毒、巨细胞病毒、冠状病毒、EB病毒、流感病毒、沙眼衣原体、结核杆菌、淋病奈瑟菌、幽门螺杆菌、肺炎衣原体、刚地弓形虫、解支原体等实时荧光PCR检测的标本采集与处理、引物和探针设计及临床意义。本书资料翔实、新颖，实用性、指导性强，是从事临床疫病研究、诊治的重要参考书，适合临床检验专业技术人员、各级临床医师和医学院校师生阅读参考，也可作为推广应用此项技术的培训教材。

第1章　临床PCR技术的发展历史及趋势

　第一节　PCR的起源和耐热DNA聚合酶的应用

　　一、PCR的起源

　　二、耐热DNA聚合酶的应用

　第二节　PCR的基本原理

　第三节　PCR的反应动力学

　第四节　PCR扩增体系和扩增条件

　　一、PCR扩增体系

　　二、PCR扩增条件

　　三、PCR扩增结果分析

　第五节　PCR的主要特点与发展情况

　　一、主要特点

　　二、发展情况

第2章　实时荧光PCR技术的发展历程、基本原理和方法

　第一节　发展历程

　第二节　基本原理

　　一、PCR扩增的理论模式

　　二、实时荧光PCR的理论基础

　　三、TaqMan实时荧光PCR的基本原理

　　四、双链DNA交联荧光染料实时荧光PCR的基本原理

　　五、双杂交探针实时荧光PCR的基本原理

　　六、分子信标实时荧光PCR的基本原理

　　七、蝎形探针实时荧光PCR的基本原理

　　八、数字实时荧光PCR的基本原理

　第三节　引物和探针的特点

　　一、引物特点

　　二、探针特点

第3章　临床PCR实验室的设计及质量管理体系的建立

　第一节　临床PCR实验室的标本接收及分区规划设计

　　一、标本接收要求

　　二、实验室分区设计原则及工作流程

　第二节　实验室质量管理体系的建立

　　一、实验室质量管理概述

　　二、实验室质量管理的特点

　　三、质量体系文件的特性、作用与编写

　第三节　实验室记录管理

　　一、记录的种类

　　二、记录的标志

　　三、记录填写要求

　　四、记录的封面和目录

　　五、记录保存与管理

　第四节　实验室认可与验收

第4章　PCR检验标本的采集、运送、保存及核酸提取

　第一节　标本采集、运送与保存

　第二节　常见标本的处理和保存

　第三节　标本中PCR抑制物

　第四节　核酸提取方法

第5章　实时荧光PCR测定的数据处理

　第一节　基本概念

　第二节　实时荧光PCR外标绝对定量的数学模型

　第三节　实时荧光PCR相对定量数学模型

　第四节　用曲线拟合的方法进行数据处理

第6章　实时荧光PCR仪及其发展

　第一节　PCR仪的发展历史及基本原理

　第二节　实时荧光PCR仪简介

　第三节　实时荧光PCR仪选择

　第四节　实时荧光PCR仪的使用与维护

第7章　临床PCR检验仪器设备

　第一节　天平

　第二节　离心机

　第三节　微量加样器

第8章　PCR检验的质量保证

　第一节　概述

　第二节　测定前质量控制

　第三节　核酸样本分离纯化与质量控制

　第四节　统计学质量控制

　第五节　室间质量评价

第9章　病毒核酸检测的标准物质

　第一节　概述

　第二节　检测用标准物质的制备

第10章　甲型肝炎病毒实时荧光PCR检测

第11章　乙型肝炎病毒实时荧光PCR检测

　第一节　非变异乙型肝炎病毒检测

　第二节　变异乙型肝炎病毒检测

　第三节　HBV cccDNA的检测

　第四节　HBV基因型的检测

 第五节　HBVRNA检测

 第六节　HBV全基因组测定

第12章　丙型肝炎病毒实时荧光RT-PCR检测

　第一节　丙型肝炎病毒检测

　第二节　丙型肝炎病毒基因分型检测

第13章　人免疫缺陷病毒-1实时荧光RT-PCR检测

第14章　人乳头瘤病毒实时荧光PCR检测

第15章　巨细胞病毒实时荧光PCR检测

第16章　严重急性呼吸综合征冠状病毒实时荧光RT-PCR检测

第17章　EB病毒实时荧光PCR检测

第18章　流感病毒实时荧光RT-PCR检测

第19章　沙眼衣原体实时荧光PCR检测

第20章　结核杆菌实时荧光PCR检测

第21章　淋病奈瑟菌实时荧光PCR检测

第22章　幽门螺杆菌实时荧光PCR检测

第23章　肺炎支原体实时荧光PCR检测

第24章　刚地弓形虫实时荧光PCR检测

第25章　解脲支原体实时荧光PCR检测