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本手册主要收集整理了最新的真核RNA分离及鉴定的相关方法,而对原核转录实验的介绍涉及较少。书中的实验方法均是经过试验验证的最优化的方法。全书都是围绕RNA这一中心问题展开的,每一部分都附有大量清晰的图片、表格,并且还有习题,可以帮助读者更有效地学习,也更有利于读者安排自己的试验。
本书汇集了有关RNA(核糖核酸)的分子生物学和细胞生物学的各种实验方法.包括分离提取、纯化、鉴定、生物活性的检验,以及通过对细胞内RNA状态的分析研究细胞基因的转录及其调控等。这一版新增加了大约30%的内容,涵盖了RNA研究的最新技术.比如RNAi,生物芯片和生物信息技术等;另外对许多常规实验技术也进行了更新,比如RT.PCR新技术和改良技术、5’和3’RACE、消减PCR技术,以及cDNA的合成等。
前言
第1章
重访RNA和细胞生物化学
第2章
真核基因的转录和组织
第3章
信使RNA
第4章
难对付的核糖核酸酶
第5章
分离RNA的策略
第6章
关于组织的实验原理
第7章
带plyA尾的RNA的分离
第8章 RNA制品的质量控制
第9章
点杂交分析
第10章
RNA电泳
第11章
照相纪录和影像分析
第12章
Northern分析
第13章
核酸探针技术
第14章
核酸杂交的实践
第15章
检测的原理
第16章
用抗核酶技术定量特定的mRNA
第17章
核RNA的分析
第18章
cDNA合成
第19章
逆转录PCR
第20章
定量PCR技术
第21章
转录物相减方法
第22章
mRNA差异显示
第23章
基因表达的高通量分析
第24章
RNA干扰:目的基因的沉默
第25章
基因组、转录组、蛋白质组和生物信息学
第26章
RNA一例
尾声
几粒智慧之珠
附录A
保持完整而准确的记录
附录B
对分子生物学家有用的储存液
附录C
酚的制备
附录D
溴乙锭和SYBR绿溶液的弃去
附录E
用DNase I从RNA样品中除去DNA
附录F
用RNase保温从DNA样品中除去RNA
附录G
甲酰胺、甲醛和乙二醛的去离子
附录H
硅化离心管和玻璃器具
附录I
离心:分子生物学家的主流工具
附录J
贴壁细胞的胰酶处理方案
附录K
盐析法分离高分子DNA
附录L
从植物组织提取RNA
附录M
电泳:原理、参数和安全
附录N
聚丙烯酰胺凝胶电泳
附录O
仪器和试剂供应商及服务商选登
附录P
有用的国际单位制单位
常用缩写
附录R
商标摘录
词汇表
索引
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