本书前一部分扼要介绍常用的生物化学与分子生物学的基本理论和实验方法,包括离心、电泳、层析、基因工程、基因文库的构建、PCR、DNA的制备及分析、RNA的制备及分析等,以供老师讲解及学生实验时查找。后一部分是实验部分,包括蛋白的定量、PCR、基因工程、血清白蛋白的分离纯化、酶的分离及比活的测定、Western印迹、Southern杂交等。本书适用于大学生物化学专业的学生学习阅读。
第一篇 基础理论部分
第一章 离心技术
第二章 电泳技术
第三章 层析技术
第四章 蛋白质的分离纯化
第五章 真核生物基因文库的构建
第六章 核酸杂交技术
第七章 DNA的制备与分析
第八章 聚合酶链反应
第九章 RNA的制备与分析
第十章 基因工程
第二篇 实验部分
实验1 紫外分光光度法
实验2 福林一酚试剂法(Lowry法)
实验3 考马斯亮蓝结合法
实验4 葡聚糖凝胶层析法测定蛋白质的分子量
实验5 聚丙烯酰胺凝胶板状电泳——血清蛋白的分离
实验6 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳
实验7 聚丙烯酰胺血清蛋白等电聚焦电泳
实验8 Western印迹技术
实验9 质粒DNA的制备
实验10 真核生物基因组DNA的制备与提取
实验11 PCR扩增基因
实验12 Southern杂交
实验13 Trizol法提取总RNA
实验14 MRNA的分离纯化
实验15 RNA的分子杂交技术
实验16 RNA的体外转录、末端标记和纯化
实验17 脲酶的分离纯化及比活性的测定
实验18 血清白蛋白、球蛋白的分离与纯化
实验19 重组pGEX-4T-1/His6-C-X基因构建与表达
附录
附录1 实验室急救法
附录2 常用酸碱含量
附录3 常用单位及换算方法
附录4 常用试剂配制