内容推荐 本书共分为六篇三十五个实验。DNA重组篇,主要介绍DNA重组相关技术;原核表达篇,内容涉及外源基因在大肠杆菌中的诱导表达与检测技术;植物转基因篇,介绍转基因植物的制作与检测技术;动物转基因篇,包括转基因动物的制作与检测和重组杆状病毒的构建与应用技术;基因编辑篇,介绍基因编辑技术;开放性实验篇。其中,DNA重组篇侧重于基因操作基本技能的培养,其余各篇侧重于独立设计、综合运用能力的培养。书后附有六个附录,具有较强的参考价值和实用价值。 目录 第一篇 DNA 重组技术
第一部分 DNA 的提取与鉴定 … … … … … … … … … … … … (002) 实验一 溶液的配制与器材的准备 … … … … … … … … … … (002) 实验二 质粒 DNA 的提取与检测 … … … … … … … … … … … (012) 实验三 琼脂糖凝胶电泳法检测 DNA … … … … … … … … … (025) 实验四 聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测 DNA … … … … … … … (032) 第二部分 目的基因的制备与纯化 … … … … … … … … … … (037) 实验五 PCR 技术扩增 目的基因 … … … … … … … … … … … (037) 实验六 反转录PCR 技术扩增 目的基因 … … … … … … … … (043) 实验七 目的基因的回收与纯化 … … … … … … … … … … … (049) 第三部分 DNA 的酶切与载体的构建 … … … … … … … … … (057) 实验八 目的基因与质粒 DNA 的酶切分析 … … … … … … … (057) 实验九 目的基因与质粒载体的连接与转化 … … … … … … (066) 实验十 重组质粒的鉴定 … … … … … … … … … … … … … … (076)
实验十一 大肠杆菌表达载体的设计与构建 \t (086) 实验十二 重组蛋白的诱导表达与 SDS-PAGE 检测 \t (100) 实验十三 重组蛋白的分离纯化 \t (110) 实验十四 重组蛋白的活性分析 \t (120)
实验十五 农杆菌介导法制作转基因烟草 \t (126) 实验十六 植物基因组 DNA 的提取与检测 \t (138) 实验十七 植物总 RNA 的提取与检测 \t (147) 实验十八 Southern 杂交检测外源基因的整合 \t (153) 实验十九 Northern 杂交检测外源基因的转录 \t (164) 实验二十 RT-PCR 或 qRT-PCR 技术检测外源基因的转录 \t (169) 实验二十一 报告基因表达产物 GUS 的检测 \t (180) 实验二十二 Western 杂交检测外源基因的表达 \t (189)
实验二十三 重组杆状病毒的构建与制备 \t (196) 实验二十四 重组杆状病毒介导的蛋白质亚细胞定位 \t (204) 实验二十五 重组杆状病毒感染家蚕幼虫 \t (211) 基因编辑篇 实验二十六 sgRNA 的选择和引物设计 \t (218) 实验二十七 植物 CRISPR/Cas9 载体构建及基因敲除 \t (225) 实验二十八 sgRNA 的活性检测 ( Surveyor 法) \t (232)
实验二十九 利用分子生物学技术鉴定纤维素降解微生物 \t (240) 实验三十 利用 DNA 分子标记技术分析学生群体的遗传多样性 \t (251)
附录 Ⅰ 常用培养基 、试剂和缓冲液的配制 \t (262) 附录Ⅱ 核酸和蛋白质数据 \t (275) 附录Ⅲ 本书所用大肠杆菌菌株 \t (276) 附录Ⅳ 常用分子生物学软件的使用 \t (277)
参考文献 \t (280) |