本书稿介绍了常用的生物医学（包括分子生物学、细胞生物学、病毒学、病理学等）实验方法，以及蛋白质制备和检测、色谱质谱、动物模型制备、线虫培养等技术，详细介绍了各种实验方法和技术所需仪器、设备、试剂及实验操作步骤等。

第一章 分子生物学实验
第一节 聚合酶链式反应(PCR)
第二节 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)
实验一 总RNA的提取
实验二 逆转录
第三节 实时定量PCR
第四节 感受态细胞的制备
第五节 质粒DNA小量抽提
第六节 质粒转化
第七节 质粒转染
第八节 质粒构建和鉴定
实验一 酶切
实验二 T-A克隆连接
实验三 PCR产物与载体的连接
第九节 小鼠基因组DNA制备
实验一 小鼠脾脏凋亡DNA和正常DNA制备
实验二 小鼠尾巴组织DNA纯化
第二章 细胞生物学实验
第一节 细胞的冷冻保存与复苏
实验一 细胞冻存
实验二 细胞复苏
第二节 人外周血单个核细胞的分离和培养
第三节 小鼠脾脏CD4+T细胞的分离和纯化
第四节 肿瘤组织细胞的分离和培养
第五节 小鼠骨髓树突状细胞(DC)的分离和培养
第六节 自然杀伤性(NK)细胞的分离和培养
第七节 细胞增殖实验
实验一 [3H]TdR掺入检测细胞增殖法
实验二 MTT比色法
实验三 CFSE法
第八节 细胞杀伤实验——乳酸脱氢酶释放法测定反应细胞杀伤活性
第九节 细胞因子测定
实验一 IL-2分泌水平检测
实验二 流式细胞术胞内染色
实验三 酶联免疫吸附测定(ELISA)
第十节 小鼠Th17细胞的体外扩增和检测
实验一 小鼠Th17细胞的体外扩增
实验二 小鼠Th17细胞的检测
第十一节 Treg细胞的诱导分化
第十二节 单克隆抗体的制备和纯化——Y-19细胞上清中IgG抗体的分离纯化
第十三节 T细胞免疫耐受的体内外诱导
实验一 体外诱导T细胞的免疫耐受
实验二 体内诱导T细胞的免疫耐受
第三章 病毒学实验
第一节 CVB3病毒的扩增和病毒滴度测定
实验一 CVB3的扩增
实验二 半数细胞培养物感染量(TCID50)法
实验三 空斑形成单位(PFU)法
第二节 登革病毒的扩增和病毒滴度测定
实验一 登革病毒的扩增
实验二 TCID50法测定登革病毒的病毒滴度
第三节 应用昆虫杆状病毒表达系统进行蛋白表达
第四章 蛋白质制备和检测
第一节 蛋白纯化
实验一 His-tag蛋白质纯化
实验二 GST-tag蛋白质纯化
第二节 蛋白印迹(Western blot)实验
第三节 考马斯亮蓝染色
第四节 流式细胞仪检测蛋白表达
实验一 细胞悬液的制备
实验二 红细胞溶解
实验三 细胞表面抗原的染色
实验四 细胞内抗原的染色
第五节 免疫共沉淀
第六节 凝胶电泳迁移实验(EMSA)
第五章 病理学实验
第一节 常规石蜡切片的制备
第二节 常规冰冻切片的制备
第三节 HE染色
第四节 纤维化(Masson)染色
第五节 天狼猩红染色
第六节 免疫组织化学染色
第七节 免疫荧光染色
第八节 DAPI染色
第六章 质谱实验
第一节 质谱样品制备
实验一 胶内酶解
实验二 C18除盐小柱(StageTip)脱盐
第二节 色谱-质谱联用仪使用方法
实验一 仪器状态检查
实验二 序列编辑与样品采集
实验三 数据查看与数据质量判断
第七章 动物实验操作及模型建立
第一节 小动物血液采集
实验一 小鼠眼眶静脉丛采血
实验二 小鼠摘眼球取血
第二节 常用的小动物给药方法
实验一 小鼠灌胃
实验二 鼻腔滴注给药
实验三 小鼠尾静脉注射
实验四 高压尾静脉注射
实验五 小鼠腹腔注射CVB3
第三节 柯萨奇病毒性心肌炎急性感染模型的建立
第四节 系统性红斑狼疮小鼠模型的建立
第五节 非清髓异基因造血干细胞移植模型的建立
第六节 过表达外源基因小鼠骨髓嵌合模型的建立
第八章 线虫实验
第一节 线虫培养
第二节 线虫PCR鉴定基因型
第三节 线虫杂交
第四节 显微注射转基因技术
第五节 线虫的RNA干扰技术
参考文献