内容推荐 本书读者对象定位于高等医药院校及研究机构的硕士和博士研究生。主要是作为医学研究生分子生物学实验课必修课或选修课教材,同时也可以作为医学院校研究生课题研究过程中分子生物学技术选择和应用的参考用书。本书的主要目的是帮助研究生理解各种分子生物学技术的基本原理、主要用途和主要流程,学会在研究中正确选用适合各自课题的分子生物学技术。 全书主要由四部分内容构成。第一部分是分离纯化制备技术,涵盖从体外基因获取、重组、序列分析、体外突变及表达等基本技术;第二部分属于分析检测技术;第三部分集中介绍了基因修饰改造技术;最后是生物化学和分子生物学研究的综合技术应用。此外,附录部分继续提供了分子生物学实验中常用的资料、参数以及常用试剂的配制。 作者简介 高国全,教授,博士研究生导师,现任中山大学中山医学院副院长、生物化学教研室主任,广东省生物化学和分子生物学学会理事长,广东省基因操作和生物大分子产物工程技术研究中心主任,海洋微生物功能分子广东省高校重点实验室主任,中国生物化学和分子生物学学会理事、医学分会常务理事;入选教育部新世纪优秀人才计划、广东省高等学校干百十工程国家级培养对象、“广东特支计划”百千万工程领军人才,获宝钢优秀教师、广东省教学名师等荣誉;享受国务院政府津贴。长期从事糖尿病、肥胖和肿瘤代谢与血管病理性变化的机制研究。获得国家自然科学基金面上项目7项、科技部新药研制重大专项2项、CMB学者项目、教育部新世纪优秀人才支持计划、广东省自然科学基金团队项目等基金的资助。发表Joumal 0f Biological Chemistry,Diabetes等SCI收录论文50余篇,被引1664次,h—Inclex 21。 目录 绪论 第一节 分子生物学技术的历史和意义 一、医学分子生物学是分子生物学的重要分支 二、基因操作是分子生物学技术的核心 三、蛋白质的研究较基因操作更为复杂 第二节 医学分子生物学实验设计 一、研究课题的选择 二、研究策略和技术路线设计 三、实验方法选择原则 四、实验设计注意事项 五、实验数据的整理和分析 第三节 分子生物学实验实施 一、实验室基本设备需求 二、实施实验的细节 三、实验室安全 第四节 分子生物学实验的伦理学要求 一、医学伦理学要求 二、实验动物伦理学要求 第一章 核酸分子杂交技术 第一节 核酸探针及其标记 一、探针的种类及其选择 二、核酸标记物及其选择 三、核酸探针的标记方法 四、标记探针的纯化 第二节 Southern印迹杂交 一、固相支持物与印迹方法的选择 二、Southern印迹杂交的基本过程 三、Southern印迹杂交的注意事项 第三节 Northern印迹杂交 一、Northern印迹杂交的基本过程 二、Northern印迹杂交的注意事项 第四节 其他核酸分子杂交 一、斑点杂交与狭缝印迹杂交 二、原位杂交 三、液相分子杂交 第二章 聚合酶链反应 第一节 PCR技术概述 一、PCR技术的发展历程及科学价值 二、PCR技术的基本原理 三、PCR反应体系 四、PCR反应的基本步骤 第二节 PCR的引物设计和反应条件优化 一、PCR引物的设计 二、PCR反应条件的优化 第三节 PCR技术的基本类型及应用 一、PCR技术的主要类型 二、PCR技术的实际应用 第四节 PCR产物的定性和定量检测方法 第五节 定量PCR 一、相对定量PCR技术和绝对定量PCR技术 二、实时定量PCR技术的原理 三、应用于实时定量PCR中的荧光探针与荧光染料 四、实时定量PCR的实验流程 五、实时定量PCR常见问题及优化方案 六、实时荧光定量PCR的国际化标准 七、实时定量P(R技术在医学上的应用 八、绝对定量PCR技术 第三章 DNA测序技术 第一节 DNA测序技术的发展 一、第一代测序技术 …… 第四章 蛋白质的定性定量分析技术 第五章 蛋白质的空间结构分析技术 第六章 蛋白质相互作用研究技术 第七章 蛋白质组学技术 第八章 蛋白质的化学修饰分析技术 第九章 基因表达谱分析技术 第十章 基因转录调控与染色质结构分析技术 第十一章 物质代谢与代谢物组学研究技术 第十二章 DNA体外重组技术 第十三章 外源基因在原核细胞的表达技术 第十四章 外源基因在真核细胞中的表达技术 第十五章 蛋白质的分离纯化技术 第十六章 基因功能的研究策略 第十七章 疾病相关基因的鉴定和分析技术 第十八章 基因突变技术 第十九章 细胞外囊泡研究技术 第二十章 遗传修饰动物的设计构建和应用技术 第二十二章 非编码RNA研究策略与技术 第二十三章 合成生物学技术 附录I 分子生物学实验微量操作技巧 附录II 分子生物学实验教学案例推荐 附录III 分子生物学实验设计中的常见 附录IV 分子生物学实验资料参考 中英文名词对照索引 |