基因沉默技术是研究基因功能的关键技术，近年倍受重视。王廷华、张连峰、董坚主编的这本《基因沉默理论与技术（第3版）》总结了各类基因沉默技术，介绍了基本理论与实验方法。包括反义核酸技术，RNA干扰技术，小RNA技术，基因下调和基因敲出技术。其中大部分技术均为本实验室实践总结，有较强的适用性。此外，技术原理、技术操作步骤主要以流程图展示，使之更一目了然，强化实验操作经验和注意事项内容，提高实验可靠性操作性。本书是目前市场上较为全面，适用性最强，反映RNA干扰现状、与操作的有用著作。

王廷华、张连峰、董坚主编的《基因沉默理论与技术（第3版）》是《21世纪生物技术系列》的一个分册。全书系统地介绍了基因沉默的概念、原理、运用，以及不同的基因沉默技术的理论与技术细节。对基因沉默进入深入研究，可帮助人们进一步揭示生物体基因遗传表达调控的本质。利用基因沉默在基因治疗中有效抑制有害基因的表达，可达到治疗疾病的目的；在功能基因组方面，通过有选择地使某些基因沉默，可以测知这些基因在生物体基因组中的功能。基因沉默技术具有巨大的潜在应用价值。

本书可供生物医学专业研究生、本科生及从事基因沉默研究的科研人员阅读和实验时参考。

第一章 基因沉默概论

 第一节 基因沉默的概念、发现及分类

 第二节 基因沉默的原理及发生

 第三节 研究基因沉默的意义

 第四节 基因沉默的应用

 第五节 展望

第二章 基于化学合成法的siRNA干扰技术

 第一节 什么是

 第二节 靶序列确定及化学合成方法

 第三节 siRNA转染细胞的方法及注意事项

 第四节 siRNA有效片段筛选意义和方法

 第五节 siRNA干扰效率检测与效果评价

 第六节 siRNA在生物医学中的应用

 第七节 问题与展望

第三章 microRNA沉默靶基因及其应用

 第一节 microRNA的发现和基本概念

 第二节 microRNA的结构与形成

 第三节 microRNA与疾病

 第四节 microRNA与siRNA的区别

 第五节 microRNA的研究手段

 第六节 microRNA功能分析确定

 第七节 microRNA表达检测

 第八节 microRNA研究展望

第四章 siRNA技术构建G6PD缺陷型A375稳转细胞株

 第一节 G6PD缺陷型A375稳转细胞株的构建方法

 第二节 A375-G6PD稳转细胞株的功能检测

 第三节 A375-G6PD稳转细胞株的应用

第五章 基于PENK基因干扰克隆载体构建的RNA干扰技术

 第一节 实验原理与实验目的

 第二节 实验设备、试剂

 第三节 实验步骤

第六章 α-突触核蛋白干扰技术

第七章 人类免疫缺陷病毒转染皮质神经元

第八章 单纯疱疹病毒转染原代皮质神经元和脊髓神经元

第九章 腺病毒转染原代皮质神经元和脊髓神经元

第十章 基因敲减理论与实验技术

 第一节 基因敲减技术发展简史

 第二节 基因敲减的概念

 第三节 基因敲减的原理

 第四节 基因敲减的应用前景

 第五节 展望

第十一章 基因组编辑技术

 第一节 显微注射技术

 第二节 胚胎移植

 第三节 转基因动物制作

 第四节 基因打靶介导的敲除和敲入动物的制作

 第五节 转座子技术在基因修饰中的应用

 第六节 TALEN技术介导的敲除动物的制作

 第七节 CRISPR/Cas技术介导的基因敲除动物的制作

 第八节 克隆动物制作

第十二章 调控eIF-5A1的microRNA预测与验证

 第一节 eIF-5A1靶microRNA的生物信息学预测

 第二节 eIF-5A1靶microRNA荧光素酶报告实验验证

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