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书名 基因工程实验(国家级实验示范中心配套教材)
分类 科学技术-自然科学-生物科学
作者 陈雪岚
出版社 科学出版社
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简介
编辑推荐

陈雪岚主编的《基因工程实验》围绕基因工程学的基本理论、基本技术及基因工程学在实践中的应用,围绕基因工程的基本程序:提-P(PCR)-切-连-转-筛-表-检,系统阐述了基因组DNA的提取、植物总RNA的提取和mRNA的纯化、质粒的提取、PCR扩增、限制性内切酶的酶切反应、凝胶电泳进行DNA的分离和纯化、DNA片段的体外连接、感受态细胞的制备、重组子的转化、菌落PCR筛选、重组质粒的酶切鉴定、外源基因的诱导表达、SDS-PAGE对诱导产物的检测、Western免疫印迹检测这些常用的基因工程学技术的原理及方法。在此基础上增加了Southern印迹实验和近几年应用较多的全长cDNA文库的构建方法、凝胶阻滞实验和染色质免疫共沉淀技术,供有条件的单位选用。本书的特点是内容详实、可操作性强。

内容推荐

陈雪岚主编的《基因工程实验》包括18个实验,分别是基因组DNA的提取、总RNA和mRNA的提取、质粒DNA的提取、目的基因的获得、限制性内切酶的酶切反应、凝胶电泳法进行DNA的分离和纯化、DNA片段的体外连接、大肠杆菌感受态细胞的制备、重组子的转化、菌落PCR筛选阳性重组子、重组质粒的酶切鉴定、外源基因在大肠杆菌中的诱导表达、基因表达产物的检测分析、Western Blotting实验、Southern印迹实验、全长DNA文库的构建、凝胶阻滞实验和染色质免疫共沉淀技术。

《基因工程实验》内容清晰准确、简明扼要,便于指导操作。可作为综合性大学、师范和农林院校生物工程、生物技术、生物制药等专业基因工程实验指导用书。

目录

前言

实验1 基因组DNA的提取

 实验1.1 植物基因组DNA的提取

 实验1.2 动物基因组DNA的提取

 实验1.3 细菌基因组DNA的提取

 实验1.4 酵母菌基因组DNA的提取

实验2 总RNA和mRNA的提取

 实验2.1 Trizol法提取总RNA

 实验2.2 异硫氰酸胍/酚一步法提取总RNA

 实验2.3 总RNA提取试剂盒

 实验2.4 mRNA的分离纯化

实验3 质粒DNA的提取

 实验3.1 碱裂解法少量提取质粒DNA

 实验3.2 少量质粒提取试剂盒

实验4 目的基因的获得

 实验4.1 PCR扩增

 实验4.2 反转录PCR

实验5 限制性内切酶的酶切反应

 实验5.1 pUC18/19质粒DNA的EcoRI单酶解

 实验5.2 HindⅢ和SalI对pUC18/19质粒DNA的双酶切

实验6 凝胶电泳法进行DNA的分离和纯化

实验7 DNA片段的体外连接

实验8 大肠杆菌感受态细胞的制备

实验9 组子的转化

实验10 菌落PCR筛选阳性重组子

实验11 重组质粒的酶切鉴定

实验12 外源基因在大肠杆菌中的诱导表达

实验13 基因表达产物的检测分析:SDS-PAGE

实验14 Western Blotting(蛋白免疫印记)实验

实验15 Southern印迹实验

实验16 全长CDNA文库的构建

实验17 凝胶阻滞实验

实验18 染色质免疫共沉淀技术

参考文献

附录一 基因工程实验中的常用数据和换算关系

附录二 基因工程实验常用试剂、溶液和缓冲液

附录三 PCR实验引物设计原则

随便看

 

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更新时间:2025/4/7 9:53:22