本书共分四部分，包括植物基因工程技术、牧草基因工程概述、冰草转基因及附录。植物基因工程技术部分在参考有关基因工程及分子育种等参考书基础上，详细介绍了有关植物基因工程中应用的工具酶和克隆载体及载体的构建、完整的遗传转化体系的建立、遗传转化方法及转基因植株的检测与鉴定的原理和方法。牧草基因工程概述部分论述了牧草基因工程的发展及牧草基因工程抗病、抗虫及抗非生物胁迫基因工程育种，阐述了牧草病害、虫害及非生物胁迫的种类、防治方法、相应的抗性基因及其在牧草育种中的应用。冰草转基因部分详细介绍了内蒙古农业大学牧草育种实验室在冰草转基因研究中所做的工作及成果，包括冰草组织培养再生体系的建立、冰草的遗传转化及分子检测、转基因冰草植株的生物学特性及抗性鉴定。附录部分介绍了几种常用抗生素的配制和使用浓度、几种基本培养基的配方及冰草转基因中的部分图片。可供各大专院校作为教材使用，也可供从事相关工作的人员作为参考用书使用。

本书详细介绍了有关植物基因工程中所应用的工具酶和克隆载体的构建、完整的遗传转化体系的建立、遗传转化方法及转基因植株的检测与鉴定原理和方法；论述了牧草基因工程的发展，牧草病害、虫害及非生物胁迫的种类、防治方法、相应的抗性基因及在牧草育种中的应用；并详细介绍了内蒙古农业大学牧草育种实验室所做的冰草转基因研究工作。

本书可供从事植物生物技术、牧草及草坪草生物技术、草业科学等领域工作的科研人员、专业技术人员及相关大中专院校教师和学生参考。

序言

前言

第一篇 植物基因工程技术

第一章 基因工程常用的工具酶和克隆载体

 第一节 常用的工具酶

一、限制性内切核酸酶

二、DNA连接酶

三、DNA聚合酶

四、DNA修饰酶

五、单链内切核酸酶

六、外切核酸酶

 第二节 基因工程中常用的克隆载体

一、质粒克隆载体

二、病毒(噬菌体)克隆载体

三、染色体定位整合克隆载体

四、启动子探针型克隆载体

五、诱导型表达克隆载体

六、组织特异性表达克隆载体

七、含增强子表达克隆载体

第二章 遗传转化体系的建立

 第一节 遗传表达载体的构建

一、外源目的基因的取得

二、基因克隆载体的分离提纯

三、重组DNA分子的形成

四、重组DNA分子(重组子)的筛选

 第二节 植物遗传转化受体系统的建立

一、植物遗传转化受体系统的条件

二、用于植物遗传转化受体系统的材料

三、植物基因转化受体系统建立的程序

第三章 遗传转化方法

 一、以载体为介导的间接转化

 二、DNA直接转化法

 三、种质系统介导基因转化

 四、植物转基因方法评价

第四章 转基因植株的检测与鉴定

 第一节 外源基因转化的鉴定

一、标记基因的检测

二、PCR检测

三、分子标记

四、Southern杂交

 第二节 外源基因表达的检测

一、外源基因表达在转录水平的检测

二、外源基因表达的蛋白质水平的检测

三、生理生化检测法

四、生物鉴定法

第二篇 牧草基因工程概述

第一章 牧草基因工程的兴起与发展

 一、豆科牧草转基因研究进展

 二、禾本科牧草和草坪草基因工程研究进展

第二章 牧草基因工程育种的目标与存在的问题

 第一节 牧草基因工程抗病育种

一、牧草病害的种类

二、牧草病害的防治办法

三、牧草抗病基因工程育种

 第二节 牧草基因工程抗虫育种

一、牧草虫害的种类

二、虫害的防治

三、牧草抗虫害基因工程

 第三节 抗非生物胁迫基因工程育种

一、抗除草剂基因工程育种

二、抗逆基因工程育种

 第四节 品质改良

一、消化率

二、蛋白质

三、可溶性碳水化合物

四、抗营养因子

 第五节 牧草转基因存在的问题

第三篇 冰草转基因

第一章 冰草转基因研究的历史背景与意义

 一、冰草转基因研究的历曼背景

 二、冰草转基因研究的意义

第二章 冰草组织培养再生体系的建立

 第一节 以幼穗为外植体的冰草属植物组织培养再生体系的建立

一、材料与方法

二、结果与分析

三、结论

 第二节 以成熟胚为外植体的冰草属植物组织培养再生体系的建立

一、以蒙农杂种冰草成熟胚组织培养再生体系的建立

二、四种冰草成熟胚组织培养再生体系的建立

 第三节 冰草愈伤组织细胞悬浮培养初探

一、材料与方法

二、结果与分析

三、结论

第三章 冰草的遗传转化及分子检测

 第一节 冰草遗传转化体系的建立

一、目的基因

二、遗传表达载体的构建

三、冰草的遗传转化

 第二节 转基因冰草植株的分子检测

一、材料与方法

二、结果与分析

第四章 转基因冰草植株的生物学特性及抗性鉴定

 第一节 转基因冰草植株的生物学特性

一、材料与方法

二、结果与分析

三、结论

 第二节 转p5CS基因冰草植株的抗旱性鉴定

一、材料与方法

二、结果与分析

三、结论

 第三节转p5CS基因冰草植株的耐盐性鉴定

一、材料与方法

二、结果与分析

三、结论

 第四节 转CBF4基因冰草植株的抗旱性鉴定

一、材料与方法

二、结果与分析

三、结论

主要参考文献

附录

 附录一 常用抗生素的配制和使用浓度

 附录二 常用培养基的配制

 附录三 野生型λDNA上限制性内切核酸酶的识别位点

图版