第一篇 医学生物化学与分子生物学实验基础知识
第一章 医学生物化学与分子生物学实验一般知识
第一节 医学生物化学与分子生物学实验的基本特点
第二节 实验室安全及规则
第三节 实验报告书写
第二章 基本实验操作
第一节 洗涤和干燥
第二节 常用的实验操作技术
第三章 实验仪器简介
第一节 分光光度计
第二节 离心机
第三节 高效液相色谱仪
第四节 电泳仪
第五节 PCR仪
第六节 真空冷冻干燥机
第七节 高压蒸汽灭菌锅
第八节 恒温培养箱
第九节 生物安全柜
第二篇 医学生物化学与分子生物学基本技术原理
第四章 分光光度技术
第一节 分光光度技术基本原理
第二节 (722型)分光光度计的简介
第五章 离心技术
第一节 离心技术基本原理
第二节 离心机的组成
第三节 离心方法
第六章 电泳技术
第一节 电泳技术发展简史
第二节 电泳基本原理
第三节 影响电泳分离的主要因素
第四节 电泳分类
第五节 常见电泳技术
第七章 层析(色谱)技术
第一节 层析(色谱)技术发展简史
第二节 层析的分类
第三节 层析方法的一般原理
第四节 常见的层析技术
第八章 核酸的分离与纯化
第一节 核酸分离的原则
第二节 核酸分离的主要步骤
第三节 核酸的纯化
第四节 核酸浓度的测定
第五节 核酸的保存
第九章 聚合酶链反应(PCR)
第一节 PCR的基本原理
第二节 PCR反应条件
第三节 常见的几种PCR技术
第四节 PCR技术的应用及其注意事项
第十章 印迹技术
第十一章 基因工程
第一节 基因工程发展简史
第二节 基因工程基本原理
第三节 基因工程的基本过程
第三篇 医学生物化学与分子生物学基础实验
第十二章 蛋白质
实验一 蛋白质的定性试验
实验二 离子交换层析分离氨基酸
实验三 凝胶层析法分离蛋白
实验四 蛋白质定量分析
实验五 血清蛋白的乙酸纤维薄膜电泳
第十三章 酶学
实验一 酶定性
实验二 丙二酸抑制琥珀酸脱氢酶实验
实验三 琼脂糖凝胶电泳法分离乳酸脱氢酶同工酶
实验四 碱性磷酸酶Km测定
实验五 3-磷酸甘油醛脱氢酶偶联法测定血清醛缩酶活性
第十四章 糖代谢
实验一 运动对骨骼肌糖代谢的影响
实验二 血糖浓度测定
实验三 肾上腺素和胰岛素对家兔血糖浓度的影响
实验四 肝糖原的提取和鉴定
第十五章 脂代谢
实验一 磷酸甘油氧化酶法测定血清甘油三酯测定
实验二 血清总胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇
实验三 血清总胆固醇的测定——邻苯二甲醛直接显色法
实验四 酮体的生成及鉴定
实验五 琼脂糖凝胶电泳分离血清脂蛋白
第十六章 氨基酸代谢
实验一 血清丙氨酸氨基转移酶活性测定
实验二 氨基移换及精氨酸酶在尿素形成中的作用
第十七章 分子生物学基础实验
实验一 细菌质粒DNA的提取及紫外吸收法测定核酸的含量
实验二 质粒DNA提取(质粒小量提取试剂盒)
实验三 PCR扩增
实验四 琼脂糖凝胶电泳分离DNA
实验五 肝组织中核酸的提取和核酸组分的鉴定
实验六 真核基因组DNA的提取
实验七 真核细胞RNA提取
实验八 RT-PCR方法
实验九 荧光定量PCR测定培养Hela细胞中GAPDH的含量
第四篇 医学生物化学与分子生物学综合设计实验
第十八章 蛋白质和酶的纯化
实验一 血清中IgG的分离纯化
实验二 红细胞中SOD分离纯化及活性鉴定
第十九章 IL-29基因亚克隆及其在大肠埃希菌中表达
实验一 PCR扩增目的基因及其琼脂糖凝胶电泳回收
实验二 质粒DNA及目的基因的限制性内切酶酶切
实验三 质粒DNA与目的基因的连接
实验四 感受态细胞的制备及转化
实验五 阳性克隆的筛选
实验六 克隆基因的诱导表达
第二十章 原核表达IL-29分离纯化
实验一 包涵体的制备、洗涤
实验二 包涵体的裂解和洗涤
实验三 目的蛋白质Ni2+金属离子螯合层析分离纯化
实验四 Westlern_blot鉴定
第二十一章 IL-29复性及活性鉴定
实验一 纯化蛋白的复性
实验二 IL-29诱导Hela细胞中2’5’-寡聚腺苷酸合成酶(2’5’-OAS)的荧光定量PCR分析
第二十二章 自主设计实验
实验一 凋亡细胞DNA片断的琼脂糖电泳分析
实验二 酪蛋白等电点的测定
实验三 双荧光报告基因重组体的转染及荧光显微镜观察
实验四 牛血清白蛋白聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳
实验五 完全自主设计实验
附录
附一 常用缓冲溶液的配制
附二 常用酸碱摩尔溶液的配制
附三 常用酸碱指示剂的配制
附四 常用抗凝试剂的配制
附五 国际单位制的基本单位