本书编写的宗旨是简明、实用。全书体例框架分三大模块。第一模块是扼要地介绍分子生物学技术的基础理论。主要包括八大技术：核酸分离与纯化、蛋白质分离与纯化、电泳、核酸分子杂交、放射性自显影、PCR、生物芯片及流式细胞术。第二模块是分子生物学实验的基本方法。主要编写了分子生物学的基本实验和常用方法。为加强学生的动手能力，这部分详细地介绍了实验原理、试剂的配制、操作步骤及所需仪器和材料等。第三模块是附录部分。主要内容包括：分子生物学实验中常用试剂的配制方法及常用资料和参数等。此外，还有附录中提供了分子生物学理论与实验的重要知识点，这将有助于学生对分子生物学技术有一个相对全面的了解，以便加深理论与实践的结合。相信本书定能成为医学本科初学者的入门教材，并能为以后的深造学习奠定实验基础，同时也能成为广大医学生了解分子生物学的良师益友。

本书介绍了分子生物学技术的基础理论、医学分子生物学实验的基本方法及其在科学研究中的应用。主要内容有核酸的分离制备、蛋白质的分离纯化、电泳技术、核酸分子杂交、放射自显影术、PCR技术、生物芯片技术、流式细胞术的基础理论和实验技术。

本书主要读者对象为医学院校本科、七年制学生，也可作为硕士研究生、相关学科进修生和教师的参考书。

第一部分 分子生物学技术的基础理论

 第一章 核酸的分离制备

一、核酸分离制备的总原则

二、核酸提取的主要步骤

三、制备核酸时应注意的问题

四、核酸提取

五、核酸沉淀

六、核酸定量

七、核酸保存

 第二章 蛋白质的分离纯化

一、蛋白质分离纯化的一般原则

二、蛋白质分离纯化的主要方法

三、蛋白质纯度鉴定与含量测定

 第三章 电泳技术

一、基本原理

二、影响电泳迁移率的因素

三、核酸电泳的指示剂与染色剂

四、不同波长紫外线对EB—DNA复合物的影响

 第四章 核酸分子杂交

一、基本原理

二、探针的种类

三、探针的标记方法

四、核酸分子杂交的基本方法

五、常见的放射性核素标记物的比较

 第五章 放射自显影术

一、放射自显影术的基本原理

二、放射自显影的特点

三、放射自显影的应用

 第六章 PCR技术

一、PCR技术的基本原理

二、PCR主要相关技术

三、PCR技术在医学中的主要应用

 第七章 简介生物芯片技术

一、基本概念

二、检测的基本过程

三、生物芯片的类型

四、生物芯片技术在医学领域中的应用

 第八章 流式细胞术

第一节 流式细胞术的基本原理

第二节 流式细胞仪的分类和基本构造

第三节 流式细胞仪的主要技术指标

第四节 流式细胞仪应用的技术要求

第五节 流式细胞仪在医学研究中的应用

第二部分 分子生物学实验的基本方法

 实验一 细菌的培养与收集

 实验二 质粒DNA的提取

 实验三 人外周血白细胞DNA的提取

 实验四 哺乳动物细胞基因组DNA的提取

 实验五 真核细胞总RNA的制备

 实验六 真核细胞mRNA的提取

 实验七 核酸的定量

 实验八 DNA的限制性内切酶消化法

 实验九 琼脂糖凝胶电泳法检测DNA

 实验十 聚丙烯酰胺凝胶电泳法检测DNA

 实验十一 STR的检测方法

 实验十二 低熔点琼脂糖凝胶回收DNA片段

 实验十三 DNA分子的体外连接

 实验十四 感受态细胞的制备及转化

 实验十五 重组质粒的筛选

 实验十六 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的相对分子质量

 实验十七 等电聚焦电泳法测定蛋白质的等电点

 实验十八 Western印迹法检测表达蛋白

 实验十九 免疫荧光法检测重组蛋白

 实验二十 放射免疫沉淀法检测重组蛋白

 买验二十一 RT-PCR-微孔板杂交-ELISA法检测基因表达

 实验二十二 DNA片段的印迹杂交

 实验二十三 RNA片段的印迹杂交

 实验二十四 放射性核素32P随机引物延伸标记法

 实验二十五 光敏生物素标记DNA法

 实验二十六 地高辛标记DNA探针

 实验二十七 乙型肝炎病毒的检测方法

 实验二十八 RT—PCR法检测HCV RNA

 实验二十九 PCR—SSCP分析

 实验三十 apoE多态性分析

 实验三十一 凋亡细胞梯状条带电泳

 实验三十二 流式细胞术检测细胞周期及DNA倍体分析

第三部分 附 录

 附录一 分子生物学实验中常用参数及试剂的配制

一、常见的市售酸碱

二、常用的缓冲液

三、常用酶的配制

四、常用贮存液的配制

五、杂交实验中封闭剂的配制与用途

六、放射性核素数据

七、常用物理系数及分子量标准

八、细菌培养基和抗生素

九、中国汉族等位基因频率表

 附录二 分子生物学的重要知识点

一、名词理解

二、简答题