本书涵盖了免疫细胞(包括造血干细胞和组织细胞)的分离、提取、纯化、培养、保存、增殖、活化和凋亡，以及细胞生物学活性的实验技术和研究方法，读者对象主要为普通高等医学院校本科生和研究生，可作为学习《医学免疫学》、《细胞生物学》和《医学遗传学》等课程的实验辅助教材和研究方法工具书，同时也适用于临床检验和相关实验研究人员阅读。

本书由浅入深，从细胞免疫研究的原理到实验操作步骤和试剂配制方法，逐一详细阐述，并附有图解和图表，简明易懂，是笔者从事肿瘤与血液免疫学基础与临床工作多年的心得体会。许多实验技术的学习和研究方法的完善，得益于在第二军医大学免疫学教研室期间的学习实践。

全书共19章，详细介绍了实验室基本设施、仪器设备、实验器材清洗消毒、试剂配制，细胞的提取、纯化、培养及与细胞免疫相关的生物学活性实验技术和研究方法。本书内容丰富、方法先进，并附有大量图解，操作简便易行，可作为普通高等医学院校本科生与研究生的实验辅助教材和工具书，也适用于临床检验和相关实验研究人员阅读参考。

第1章 细胞免疫实验的设施和基本条件／1

 第一节 常用无菌操作设施／1

 第二节 常用实验室设备与器械／2

 第三节 培养免疫细胞常用的器皿／6

第2章 培养器皿的清洗、包装与消毒／9

第3章 细胞培养用液／12

 第一节 平衡盐溶液／12

 第二节 常用细胞培养基和血清制备／18

 第三节 其他常用培养液／20

第4章 制备免疫细胞悬液／22

 第一节 实验所需的材料和试剂／22

 第二节 制备单个核细胞悬液／23

 第三节 去除细胞悬液中的红细胞／25

 第四节 去除死细胞的方法／25

 第五节 细胞计数／26

 第六节 计算细胞活性／27

第5章 分离与纯化免疫细胞／28

 第一节 分离人外周血细胞／28

 第二节 分离和纯化B淋巴细胞／30

 第三节 分离和纯化T淋巴细胞／34

 第四节 纯化免疫细胞亚群／36

 第五节 分离单核细胞一巨噬细胞／38

 第六节 分离和纯化组织中的巨噬细胞／40

 第七节 培养树突状细胞的方法／42

第6章 建立免疫细胞克隆／45

 第一节 建立特异性T细胞株或T细胞克隆／45

 第二节 利用小鼠脾细胞制备T细胞克隆／47

 第三节 制备人T细胞克隆／50

 第四节 建立人B细胞克隆／53

 第五节 筛选单克隆细胞／54

 第六节 细胞的培养冻存与复苏方法／55

第7章 造血干细胞的培养技术／58

 第一节 配制骨髓细胞培养试剂／59

 第二节 分离与纯化骨髓细胞／61

 第三节 小鼠骨髓细胞集落形成试验／64

 第四节 人骨髓和外周血造血干细胞的培养方法／68

第8章 用流式细胞仪检测免疫细胞／71

 第一节 免疫细胞表面分化抗原和黏附分子／71

 第二节 流式细胞术常用的染料和标记抗体／74

 第三节 选择染色的方法和封闭免疫细胞的Fc受体／77

 第四节 用流式细胞仪检测免疫细胞表面分子／79

 第五节 检测免疫细胞钙离子流入的方法／80

 第六节 检测免疫细胞活化的方法／81

 第七节 检测免疫细胞周期的方法／83

第9章 免疫细胞的增殖实验／85

 第一节 反映DNA合成的细胞增殖实验／85

 第二节 反映免疫细胞能量代谢的增殖实验／88

第10章 免疫细胞的趋化活性和抗原提呈实验／91

 第一节 免疫细胞趋化实验／91

 第二节 专职抗原提呈细胞的抗原提呈实验／93

第11章 免疫细胞的细胞毒活性实验／96

 第一节 抗体依赖细胞介导的细胞毒性实验(ADCC)／97

 第二节 非抗体依赖细胞介导的细胞毒性实验／98

 第三节 巨噬细胞活性实验／105

第12章 细胞凋亡实验／110

 第一节 概论／110

 第二节 检测凋亡细胞的DNA碎片／112

 第三节 检测凋亡细胞的核小体与膜变异／114

 第四节 检测凋亡相关蛋白／115

第13章 制备和修饰抗体／119

 第一节 选择和修饰免疫原／119

 第二节 选择动物和免疫佐剂／123

 第三节 免疫的程序／123

 第四节 单克隆抗体与杂交瘤技术／124

第14章 检测与鉴定抗体的方法／131

 第一节 检测抗体免疫实验常用的器材与基本条件／131

 第二节 标记抗原和抗体／131

 第三节 常用检测抗原与抗体的免疫方法／135

 第四节 免疫沉淀法和Western印迹实验／140

 第五节 测定抗体的结合能力和蛋白质含量／147

第15章 检测单个B淋巴细胞分泌抗体／151

 第一节 溶血空斑试验／151

 第二节 酶联免疫方法检测单个淋巴细胞分泌抗体功能／155

 第三节 抗半抗原方法／156

第16章 纯化免疫球蛋白／159

 第一节 纯化免疫球蛋白IgG／159

 第二节 纯化免疫球蛋白IgM／162

 第三节 用亲和层析纯化半抗原抗体／164

 第四节 消化免疫球蛋白／164

 第五节 检测特异性抗原抗体的活性／168

第17章 检测免疫细胞分泌的细胞因子／169

 第一节 概论／169

 第二节 白细胞介素－1／171

 第三节 白细胞介素－2／173

 第四节 白细胞介素－3／175

 第五节 白细胞介素－4／177

 第六节 白细胞介素－5／178

 第七节 白细胞介素－6／179

 第八节 白细胞介素－7／181

 第九节 白细胞介素－9／182

 第十节 白细胞介素－10／183

 第十一节 白细胞介素－11／185

 第十二节 白细胞介素－12／186

 第十三节 白细胞介素－13／188

 第十四节 白细胞介素－14／190

 第十五节 白细胞介素－15／190

 第十六节 白细胞介素－16／191

 第十七节 白细胞介素－17／191

 第十八节 白细胞介素－18／192

 第十九节 白细胞介素-8和趋化因子家族／192

 第二十节 白细胞介素家族的新成员／192

 第二十一节 肿瘤坏死因子／195

 第二十二节 干扰素／197

 第二十三节 集落刺激因子／202

 第二十四节 免疫测定法检测细胞因子／203

 第二十五节 计算免疫细胞分泌细胞因子活性单位的方法／206

第18章 细胞因子受体检测／207

 第一节 概论／207

 第二节 研究细胞因子受体的方法／208

第19章 检测免疫细胞信号转导分子／214

 第一节 检测免疫细胞核转录调节 因子／214

 第二节 检测免疫细胞cAMP／216

 第三节 流式细胞仪检测免疫细胞内钙离子释放／217

参考文献／219