本书根据编者多年来运用分子生物学技术的经验,从中医药研究实际出发,深入浅出地介绍该领域常用技术及其在中医药研究中的应用,着重解决中医药研究如何用、怎样用的问题,增加了实验技术的内容。书中所介绍的实验技术均为作者使用过的技术,并参考一些国内外公开发表的研究报告、有关公司试剂盒说明,以及包括《分子克隆实验指南》等权威专著,言之有据,同时详细介绍了实验的准备和实施,使读者可以方便地选用。同时《分子生物学技术在中医药研究中的应用》作为实验中医学系列课程之一,还获得了国家精品课程的荣誉。
第一章 绪论
第一节 分子生物学技术在中医药研究中的实例
第二节 分子生物学技术在中医药研究中的现状
第三节 中医药研究中经常使用的分子生物学技术
第四节 分子生物学技术在中医药研究中的展望
第二章 分子生物学常用基本技术
实验1 重组质粒
实验2 质粒转化大肠杆菌
实验3 阳性单菌落扩增与小量DNA制备
实验4 酶切重组质粒,电泳分离所插入的DNA
实验5 从凝胶中回收DNA
实验6 大量质粒DNA制备
实验7 哺乳类动物细胞的培养
实验8 植物细胞悬浮培养技术
第三章 DNA的研究方法
实验9 哺乳类动物基因组DNA的提取
实验10 植物基因组DNA的提取
实验11 基因组文库的建立与筛选
实验12 Southern blot
实验13 PCR
实验14 DNA双脱氧链终止法测序
实验15 动、植物药材的ISSR指纹图谱技术
实验16 中药RAPD指纹图谱技术
第四章 RNA的研究方法
实验17 总RNA提取
实验18 mRNA的分离
实验19 Northern blot
实验20 RT-PCR
实验21 ABI荧光实时定量PCR
实验22 原位杂交
实验23 基因芯片
实验24 cDNA Array
实验25 DD-PCR
实验26 cDNA库建立
实验27 基因全序列cDNA库筛选
实验28 RACE-PCR
第五章 蛋白质的研究方法
实验29 哺乳类动物组织蛋白质的提取
实验30 植物组织蛋白质的提取
实验31 Western blot
实验32 ELISA
实验33 免疫组织化学
实验34 单克隆抗体制备技术
实验35 蛋白质双向电泳
第六章 基因功能与表达调控的研究方法
实验36 RNAi
实验37 Small RNA的提取与分析
实验38 报道基因与基因调控元件的检测
实验39 点突变PCR
实验40 基因敲除技术
实验41 Footprint
实验42 凝胶阻滞分析
实验43 植物细胞的基因转化
第七章 分子生物学常用网络资源及利用
第一节 美国国家生物技术信息中心
第二节 GenBank数据库查询与搜索
第三节 BLAST
第四节 EST的电子延伸
第五节 cDNA序列的蛋白阅读框架分析(ORF)、染色体定位及其在机体各组织中的表达预测
第六节 PCR引物或序列寡核苷酸探针的在线设计
第七节 蛋白质分析
附录
附一 分子生物学实验常用仪器设备
附二 常用生物学数据
附三 常用载体
附四 分子克隆常用酶
附五 常用储存液的配制
附六 常用液体培养基
附七 常用缓冲液
附八 常用酸碱溶液的浓度与分子量
附九 不同浓度酸碱液的pH
附十 核酸的纯化(用酚-氯仿抽提)
附十一 核酸浓缩
附十二 分光光度法测定DNA及RNA含量
附十三 Sephadex的水化
附十四 放射性度量单位和数据
附十五 科学单位
附十六 离心速度和离心力换算
附十七 分子生物学术语英汉对照