本书第二版教材在第一版的基础上，做了进一步的补充和完善，其中加入了第八章方法学评价内容，以引导学生树立严谨的实验态度，明确科学的实验设计。此外针对目前生物化学与分子生物学实验技术的迅速发展，为了培养创新人才，与世界接轨，我们引进了一些现代的实验方法，在实验教材中新增了开拓性实验这一章，包括基因多态性研究、小鼠肾脏双向电泳、人体毛头发基因组DNA的提取等要求较高的实验内容。通过这些创新开拓性实验，使学生接触一些前沿的实验课题，从而极大地调动学习兴趣，挖掘学生的求知欲。

本书的实验方法严谨可靠，可操作性强，实用性强，具有部分工具书的属性。适用于高等医药院校基础生物化学实验教学，可供临床医学、药学、医学检验、口腔、预防、护理等专业根据各专业特点选择使用。

第一章 生物化学实验的基本要求

第一节 实验的准确性

一、有效数字

二、误差

三、误差的表示方法和计算

四、与质量控制有关的几个基本概念

五、统计学的一些基本概念和计算公式

第二节 实验记录及报告

一、实验记录

二、实验报告

第三节 实验样品的制备

一、动物的脏器

二、微生物

三、细胞

第四节 玻璃仪器的洗涤及各种洗液的配制法

一、初用玻璃仪器的清洗

二、使用过的玻璃仪器的清洗

三、洗涤液的种类和配制方法

第五节 试剂的配制及一些常用数据表

第二章 常见的实验方法及基本原理

第一节 离心技术

一、离心沉降速率影响因素

二、沉降系数

三、离心设备

四、制备超离心法

第二节 _层析技术

一、薄层层析

二、聚酰胺薄膜层析

三、凝胶层析

四、离子交换层析

五、亲和层析

六、气相色谱

七、高效液相色谱

第三节 电泳技术

一、影响电泳的主要因素

二、常用电泳支持介质

三、聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳

四、连续密度梯度电泳

五、SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳

六、等电聚焦电泳

七、双向电泳

八、毛细管电泳

九、电泳新技术

第四节 分光光度法

一、基本原理

二、比色法

三、分光光度法

四、浊度法

第五节 基因多态性及其检测方法

一、基因多态性

二、基因多态性的检测方法

第三章 普通实验

实验一Folin一酚法测定蛋白质含量

实验二肌糖原的酵解作用

实验三影响酶活性的因素

实验四碱性磷酸酶Km值测定

实验五乳酸脱氢酶及辅酶I琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制

实验六酮体的生成与利用

实验七血清丙氨酸氨基转移酶测定

实验八分光光度法测定血红蛋白含量及血糖

实验九蛋白质的变性与沉淀

实验十血清蛋白质的醋酸纤维薄膜电泳

第四章 综合实验

实验一质粒DNA的提取及电泳鉴定

实验二鸡卵类粘蛋白的制备及活力的测定

实验三动物肝脏DNA的提取与二苯胺测定

实验四酵母RNA的提取及醋酸纤维薄膜电泳分离核苷酸

第五章 设计实验

第六章 选择实验

实验一蛋白质的两性性质及等电点的测定

实验二枯草杆菌碱性磷酸酶的制备及酶活性的测定

实验三单核苷酸的离子交换柱层析分离

实验四SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白印迹

第七章 开拓性实验

实验一从动物毛发中提取DNA进行RAPD扩增

实验二DNA指纹图谱分析

实验三小鼠肾脏组织的双向电泳

实验四随机扩增多态DNA

第八章 方法学评价实验

实验一线性范围试验

实验二批内重复性试验

实验三回收试验

实验四干扰试验

实验五方法比较试验

实验六检测能力测定

第九章 实验室安全知识及防护知识

第十章 常用生化仪器的使用方法

第一节 称量仪器

第二节 分光光度计

第三节 离心机

第四节 干燥箱和恒温箱

第五节 电热恒温水浴

第六节 自动部分收集器

第七节 核酸蛋白检测仪

第八节 酸度计

第九节 移液器

第十一章 缓冲溶液

第一节 缓冲理论

第二节 常用缓冲液配制方法

第十二章 电泳染色方法

第一节 核酸染色

第二节 蛋白质染色

第三节 糖蛋白染色

第四节 脂蛋白染色

第五节 同工酶染色

第十三章 核酸实验方法及相关数据

第一节 核酸含量的测定

第二节 常用的核酸换算公式及某些核酸的性质

第三节 核酸的纯化与浓缩

第十四章 常用数据

第一节 常用层析介质数据

一、离子交换层析数据及参数

二、聚丙烯酰胺凝胶的技术数据

三、琼脂糖凝胶的技术参数

四、凝胶过滤层析介质的技术参数

五、SephadexG型交联葡聚糖凝胶的数据

六、SephadexG型交联葡聚糖凝胶溶胀所需时间

七、琼脂糖凝胶的数据

八、Superose的数据

九、琼脂糖凝胶Bio—GelA型的数据

十、Bio—GelP型凝胶的数据一

十一、交联聚苯乙烯凝胶Bio—BeadsS—X型的数据

十二、制备级Superdex凝胶过滤介质的数据

十三、聚乙烯醇型凝胶Toyopear·l的数据

十四、各种凝胶所允许的最大操作压

第二节 凝胶过滤用标准蛋白

一、凝胶过滤用低相对分子质量标准的组成

二、凝胶过滤用高相对分子质量标准的组成

三、凝胶过滤用相对分子质量标准品

第三节 干燥剂、致冷剂、浓缩剂及硅化剂

一、干燥剂

二、致冷剂

三、浓缩剂

四、硅烷化剂

第四节 生物化学中某些重要化合物的Mr-及pK值

第五节 一些常用单位

一、长度单位

二、体积单位

三、质量单位

四、摩尔与摩尔浓度表示法

五、十进位数量词头及符号

附录实验课教学大纲

一、本课程的目的意义

二、本课程的基本要求

三、实验教学大纲

主要参考书目