生物学是一门对实验技术依赖性很强的学科。20世纪中期的生物学已经进入分子生物学水平,这是与生物化学技术和方法的迅猛发展分不开的。本书的特点是力求全面培养学生的实验技能,使其能正确地理解实验原理,较好地掌握生物化学实验技术和方法。本书适应新的实验教学体系,实验内容少而精,既适合普通高等院校生物化学实验教学,又能留给老师和学生一定的发挥空间。
全书共分四部分,包括35个实验。基础实验部分重在基本实验技能的培训;综合实验部分着重实验原理的应用和分析能力的提高。这两部分涵盖了与生物化学理论相适应的生物化学实验内容和技术,包括糖、脂、蛋白质、核酸、酶、维生素的分离、纯化、定性或定量分析、功能和代谢的研究等。设计性实验部分在前两部分的基础上给学生一个独立实验的空间,着重培养学生的独立科研能力。附录介绍了生物化学实验室守则、实验报告书写、常用实验室操作规范、试剂的配制和一些生物化学常用数据。
本书可作为普通高等院校生命科学专业本、专科及农学、食品、生物技术各专业的教材,也可作为中学生物教师的参考用书。
第一部分 基础性实验
实验一 蛋白质及氨基酸的颜色反应
实验二 纸层析法分离氨基酸
实验三 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白
实验四 考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量
实验五 紫外吸收法测定蛋白质含量
实验六 温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响
实验七 DNA的含量测定(二苯胺法)
实验八 地衣酚显色法测定RNA含量
实验九 DNA的琼脂糖凝胶电泳
实验十 肝糖原的提取和鉴定
实验十一 3,5一二硝基水杨酸比色定糖法
实验十二 卵磷脂的提取和鉴定
实验十三 油脂酸价的测定
实验十四 荧光法测定维生素132含量
实验十五 血清谷丙转氨酶活力测定
第二部分 综合性实验
实验十六 蛋白质含量的测定(凯氏定氮法)
实验十七 DS-PAGE测定蛋白质相对分子质量
实验十八 疏水层析分离纯化α一淀粉酶
实验十九 植物组织中过氧化物酶活力的测定
实验二十 乳酸脱氢酶(LDH)活力测定
实验二十一 酵母蔗糖酶的提取及其性质的研究
实验二十二 质粒DNA的提取、酶切和鉴定
实验二十三 小牛胸腺DNA的制备
实验二十四 小牛胸腺DNA熔解温度的测量
实验二十五 植物基因组提取(CTAB法)
实验二十六 萝卜过氧化物酶rspr.z1的扩增
实验二十七 酵母RNA的提取与组分鉴定
实验二十八 粗脂肪的定量测定
实验二十九 丙二醛的测定
实验三十 发酵过程中无机磷的利用和ATP的生成(AFP的生物合成)
实验三十一 维生素C的定量测定(2,6一二氯酚靛酚滴定法)
第三部分 设计性实验
实验三十二 蛋白质的沉淀反应和等电点测定
实验三十三 蛋白质含量的测定
实验三十四 目的基因的扩增与鉴定
实验三十五 影响肝糖原含量的因素
附录
附录A 实验室规则
附录B 实验记录及实验报告
附录C 实验室基本操作和实验室常识
附录D 试剂的配制
参考文献