本书是面向21世纪课程教材《基因工程原理与应用》的配套实验教材。本书涵盖了基因工程实验的一系列基本技术，内容包括：核酸的分离纯化技术，DNA的纯化、浓度的测定及质量鉴定，电泳技术，PCR技术，分子杂交技术，探针制备与标记技术，DNA的重组与转化技术，重组体的鉴定与基因表达分析技术。本书的实验，使用者可以根据各自的实验条件和课时数进行选择。

本书为面向21世纪课程教材《基因工程原理与应用》(陈宏主编)的配套实验教材。内容包括核酸的分离纯化技术，DNA的纯化、浓度的测定及质量鉴定，电泳技术，PCR技术，分子杂交技术，探针制备与标记技术，DNA的重组与转化技术，重组体的鉴定与基因表达分析技术。书末附有基因工程操作中常用的溶液和缓冲液、基因工程实验室的要求与仪器设备。

本书可作为高等院校生物技术、生物工程、农学、园艺、畜牧、兽医、植保等生命科学各有关专业本科生和研究生《基因工程原理与应用》的配套实验教材，同时对从事基因工程、分子生物学科学研究的人员也是一本很好的实验指导书。

前言

第一章 核酸的分离纯化技术

实验一 细菌DNA的分离提取

实验二 质粒DNA的分离提取

实验三 入噬菌体DNA的分离提取

实验四 动物组织样品DNA的分离提取

实验五 动物全血样品中DNA的分离提取

实验六 动物线粒体DNA的分离提取

实验七 植物组织中DNA的分离提取

实验八 植物线粒体DNA的分离提取

实验九 植物叶绿体DNA的分离提取

实验十 病毒核酸的分离提取

实验十一 农杆菌Ti质粒DNA的分离提取

实验十二 动物组织样品总RNA的分离提取

实验十三 动物组织样品mRNA的分离提取

实验十四 植物组织样品总RNA的分离提取

实验十五 植物组织样品mRNA的分离提取

第二章 DNA的纯化、浓度的测定及质量鉴定

实验一 质粒DNA的CsCl梯度离心纯化

实验二 DNA(或RNA)的核酸酶处理纯化

实验三 凝胶中的DNA片段的回收与纯化

实验四 DNA浓度的分光光度计测定

实验五 DNA质量与浓度的凝胶电泳法测定

第三章 基因操作的基本技术I——电泳技术

实验一 核酸(DNA或RNA)的琼脂糖凝胶电泳

实验二 核酸聚丙烯酰胺凝胶电泳

实验三 核酸的脉冲电场凝胶电泳

实验四 蛋白质电泳

第四章 基因操作的基本技术Ⅱ——PCR技术

实验一 PCR技术与分析

实验二 RAPD技术

实验三 PCR—SSCP技术

实验四 PCR—SSR技术

实验五 PCR—ISSR技术

实验六 RT—PCR技术

第五章 基因操作的基本技术Ⅲ——分子杂交技术

实验一 组织切片原位杂交

实验二 细菌菌落的原位杂交

实验三 基因定位的荧光原位杂交

实验四 Sotltheion杂交分析

实验五 Northern杂交分析

第六章 基因操作的基本技术Ⅳ——探针制备与标记技术

实验一 核酸探针的制备

实验二 DNA探针的末端标记

实验三 DNA探针的随机标记

实验四 DNA探针的切口平移标记

第七章 基因操作的基本技术V——其他分析技术

实验一 M13克隆和DNA序列分析

实验二 Western印迹分析I

实验三 Western印迹分析Ⅱ

实验四 mRNA的体外翻译

实验五 克隆化DNA的定点诱变

第八章 DNA的重组与转化技术

实验一 外源DNA和质粒载体的连接反应

实验二 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化

实验三 噬菌体DNA的体外包装

实验四 根癌农杆菌介导的基因转移

实验五 基因枪法的基因转移

实验六 磷酸钙介导的基因转移

实验七 显微注射法的基因转移

实验八 脂质体介导的基因转移

第九章 重组体的鉴定与基因表达分析技术

实验一 重组质粒细胞菌落的快速鉴定

实验二 重组质粒酶切鉴定

实验三 入噬菌体重组体的鉴定分析

实验四 基因组文库的构建与检测

实验五 基因表达产物的检测分析工——细胞的裂解

实验六 基因表达产物的检测分析Ⅱ——包涵体的分离

实验七 基因表达产物的检测分析Ⅲ——包涵体的溶解和复性

实验八 外源基因在大肠杆菌中的表达

附录一 基因工程操作中常用的溶液和缓冲液

附录二 基因工程实验室的要求与仪器设备

主要参考文献