本书第五版颇受欢迎。它向学生介绍了实用生物化学目前所有的常规基础实验技术。重点放在学生们在实验课中将会遇到的实验技术上,详细地介绍了实验的原理和理论以帮助理解。为了进一步加深学生的理解,每一章均有计算例题和答案以及“关键词”,帮助学生们全面复习每一章的重点。现代生物化学技术的书籍无一例外地均有介绍分子生物学、DNA重组技术、基因分析技术、蛋白纯化技术和生物分子相互作用的章节;本书第五版全面地涵盖了上述内容。这本书主要供学习实验生物化学、分子生物学和免疫学的所有生物学科学生以及正在学习基础课程的医科学生使用。
分子生物学伴随着免疫学、细胞培养技术、蛋白分析技术(如层析、电泳、质谱分析和各种形式的分光技术)的进展而同步发展。在计划该书本次新版时,我们融入了这些进展的细节,同时又继承了上一版的内容,即重点放在生物学科学生实验的相关技术和原理上。对于一些复杂实验技术的内容本书涉及较少,因为这些内容及其进展在有关的讲座和读物中可以了解。因此,本版与早先的版本相比,对分子生物学技术的介绍更为详细。本书中有两个章节用来介绍分子生物学技术:第二章具体介绍基础理论和实用技术,第三章重点放在分子生物学技术的应用。这两章由Ralph RapIey博士编写,他是本书的新编委。第四章的免疫学技术由国家生化标准和控制机构的Susan和Robin Thorpe重新编写,他们也是本书的新编委。同时增加了一个新的章节来介绍蛋白质纯化及其在现代实验生物学中的重要性(第六章)。而早先几版关于酶技术的章节中,一直没有强调酶一底物(或抑制物)结合以及配体与膜受体和膜转运体结合的相似性。本版我们增加了一个新的章节(第八章)来介绍细胞间的相互作用和相关信号传导、放大过程的知识。
第一章 生物化学研究的基本原则
1.1生物化学的本质属性
1.2生物能学
1.3新陈代谢的研究方法
1.4实验室实际应用
1.5体内模型
1.6体外模型
1.7显微技术
1.8关键术语
1.9计算
1.10参考资料
第二章 分子生物学与基本技术
2.1引言
2.2核酸的组成及基本结构
2.3基因和基因组的复杂性
2.4遗传密码的特性
2.5核酸的细胞定位
2.6DNA的功能
2.7核酸操作:基本工具与技术
2.8核酸的分离
2.9:DNA片段的限制酶切图谱
2.10核酸印迹技术
2.1l基因探针的来源
2.12DNA探针的标记
2.13聚合酶链式反应
2.14DNA的核苷酸序列
2.15生物信息学和互联网
2.16关键术语
2.17计算
2.18参考资料
第三章 分子克隆和基因分析
3.1引言
3.2构建基因文库
3.3克隆载体
3.4杂交与基因探针
3.5筛选基因文库
3.6基因克隆的应用
3.7外源基因的表达
3.8基因分析和基因表达
3.9分析全基因组
3.10分子生物学技术与应用
3.11关键术语
3.12参考资料
第四章 免疫化学技术
4.1概述
4.2抗体的制备
4.3免疫球蛋白的纯化与裂解
4.4免疫沉淀
4.5抗体标记
4.6免疫印迹
4.7免疫测定
4.8免疫组织、细胞化学
4.9亲和力与亲合力
4.10表面胞质共振技术在免疫化学中的应用
4.11关键术语
4.12计算
4.13参考资料
第五章 离心技术
5.1概述
5.2沉降的基本原理
5.3离心机及其应用
5.4制备型转头的设计及保养
5.5样品容器
5.6制备型超速离心机的分离方法
5.7密度梯度分离的实施
5.8制备转头的选择,性能和应用
5.9亚细胞部分的分析
5.10分析型超速离心机的应用
5.1l离心机使用安全
5.12关键术语
5.13计算
5.14参考资料
第六章 蛋白质的性质、结构和纯化
6.1氨基酸和蛋白质的性质
6.2蛋白质的结构
6.3蛋白质的纯化
6.4蛋白质结构分析
6.5关键术语
6.6计算
6.7参考资料
第七章 生物分子的相互作用:I酶
7.1受体一配体的结合
7.2酶:性质与命名
7.3酶恒态动力学
7.4酶的测定
7.5底物检测
7.6酶的前恒态动力学
7.7酶的活性中心和催化机制
7.8固定化酶
7.9代谢活动的细胞调控
7.10关键术语
7.1l计算
7.12参考资料
第八章 生物分子的相互作用:Ⅱ细胞表面受体和传递体
8.1细胞表面受体的分类
8.2受体一配体结合的定量
8.3受体结构
8.4信号转导机制
8.5信号放大
8.6关键术语
8.7膜转运过程
8.8物理扩散
8.9易化扩散
8.10主动转运和离子通道
8.1l受体介导的细胞内吞作用
8.12关键术语
8.13计算
8.14参考资料
第九章 光谱技术:I原子和分子的电子光谱
9.1简介
9.2r-射线光谱和u-射线共振光谱
9.3x-射线光谱
9.4紫外光与可见光光谱
9.5荧光分光分析
9.6圆二色光谱
9.7比浊法和散射比浊法
9.8发光分析法
9.9原子光谱
9.10激光
9.11关键术语
9.12计算
9.13参考资料
第十章 光谱技术:Ⅱ振动光谱以及磁场中电子和核的自旋取向
10.1简介
10.2红外和拉曼光谱
10.3电子自旋共振波谱
10.4核磁共振波谱
10.5关键术语
10.6参考资料
第十一章 质谱技术
11.1概述
11.2质谱仪
11.3电轰击离子化
11.4化学电离
11.5场电离
11.6离子解吸法
11.7离子挥发法
11.8分析器
11.9检测器
11.10串联质谱仪
11.11关键术语
11.12计算
11.13参考资料
第十二章 电泳技术
12.1基本原理
12.2支持介质
12.3蛋白质电泳
12.4核酸电泳
12.5毛细管电泳
12.6关键术语
12.7计算
12.8参考资料
第十三章 色谱技术
13.1概述
13.2色谱理论和应用
13.3低压柱色谱
13.4高压液相色谱
13.5吸附色谱
13.6分配色谱
13.7离子交换色谱
13.8分子排阻色谱
13.9亲和色谱
13.10气液色谱
13.11薄层色谱
13.12色谱体系的选择
13.13关键术语
13.14计算
13.15参考资料
第十四章 放射性同位素技术
14.1放射性的特性
14.2放射性的检测和测量
14.3放射性计数和数据分析的其他用途
14.4放射性示踪实验的优势及限制因素
14.5安全性
14.6放射性同位素在生物学中的应用
14.7关键术语
14.8计算
14.9参考资料
第十五章 电化学技术
15.1概述
15.2电化学技术的原理
15.3氧化还原反应
15.4pH电极
15.5离子选择电极和气敏电极
15.6clark氧电极
15.7HPLC的电化学检测器
15.8生物传感器
15.9关键术语
15.10计算
15.11参考资料