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书名 | 磷脂酰胆碱在LET-607寿命调控通路中的作用和机制研究 |
分类 | 科学技术-医学-基础医学 |
作者 | 何斌 |
出版社 | 东北大学出版社 |
下载 | ![]() |
简介 | 内容推荐 \t本书使用模式生物秀丽隐杆线虫研究哺乳动物细胞防御反应和蛋白稳态控制反应的调控因子CREBH的秀丽隐杆线虫直系同源物LET-607;揭示了LET-607与胞质DAF-16应激途径之间的新型交流,即抑制LET-607会诱导DAF-16的适应性激活,而DAF-16是秀丽隐杆线虫中细胞质应激反应的主要调节因子,因此抑制LET-607能改善其健康和寿命。这揭示了不同应激途径之间交流对动物适应性的重要性,并确定LET-607/CREBH和特定的磷脂酰胆碱是DAF-16和寿命的调控因子。本书的研究结果描述了连接不同应激反应途径的细胞机制,并突出了其在动物长寿中的重要性。 目录 \t1 绪论 \t1.1 秀丽隐杆线虫 \t1.2 内质网应激反应 \t1.2.1 IRE \t1.2.2 PERK \t1.2.3 ATF \t1.2.4 秀丽隐杆线虫的内质网应激反应 \t1.3 DAF-16/FOXO \t1.3.1 DAF-16 \t1.3.2 FOXO \t1.4 CREBH/LET-607 \t1.4.1 CREBH \t1.4.2 LET-607 \t1.5 磷脂酰胆碱 \t1.6 立题依据及研究意义 \t1.6.1 立题依据 \t1.6.2 研究意义 \t2 材料与方法 \t2.1 秀丽隐杆线虫品系及其培养条件 \t2.2 实验室用水 \t2.3 秀丽隐杆线虫生长培养基的制备 \t2.4 OP50-1菌株和RNA干扰菌株培养皿的制备 \t2.5 LB培养基 \t2.6 M9缓冲液(M9 Buffer) \t2.7 S缓冲液(S Buffer) \t2.8 秀丽隐杆线虫基因组提取液(2X Lysis Buffer) \t2.9 PBS缓冲液(PBS Buffer) \t2.10 Haira's溶液(Hajra's Solution) \t2.11 10%TritonTM X-100溶液 \t2.12 50xTAE电泳缓冲液 \t2.13 尼罗红(Nile Red)染料 \t2.14 油红O(Oil-Red-O)染料 \t2.15 秀丽隐杆线虫脂肪尼罗红染料染色 \t2.16 秀丽隐杆线虫脂肪油红O染料染色 \t2.17 秀丽隐杆线虫脂肪油红O染料染色定量 \t2.18 大肠杆菌感受态细胞的制备 \t2.19 秀丽隐杆线虫基因组提取 \t2.20 秀丽隐杆线虫冷冻保存与复苏 \t2.2 l秀丽隐杆线虫拍照 \t2.22 秀丽隐杆线虫体长测量实验 \t2.23 秀丽隐杆线虫同步化处理 \t2.24 秀丽隐杆线虫RNA提取 \t2.25 第一链cDNA合成 \t2.26 荧光定量PCR(QPCR) \t2.27 转录组测序 \t2.28 ChIP-seq分析 \t2.29 气相色谱串联质谱分析法(GC-MS/MS) \t2.30 脂肪酸分析 \t2.31 薄层色谱法(TLC) \t2.32 秀丽隐杆线虫应激实验 \t2.32.1 绿脓杆菌感染实验 \t2.32.2 活性氧应激实验 \t2.32.3 热应激实验 \t2.32.4 内质网应激实验 \t2.33 秀丽隐杆线虫寿命实验 \t2.34 秀丽隐杆线虫产卵量分析 \t2.35 let-607p::GFP::let-607转基因线虫构建 \t2.35.1 构建let-607p::let-607载体 \t2.35.2 构建let-607p::GFP::let-607载体 \t3.35.3 显微注射 \t2.35.4 整合let-607p::GFP::let-607载体到线虫基因组 \t2.36 化合物补充实验 \t2.36.1 神经酰胺 \t2.36.2 磷脂酰胆碱 \t2.36.3 离子霉素 \t2.36.4 1-油酰基-2-乙酰基-sn-甘油 \t2.36.5 氯化胆碱 \t2.36.6 地昔帕明 \t2.37 数据量化和统计分析 \t2.38 主要仪器 \t3 结果 \t3.1 LET-607对秀丽隐杆线虫应激反应的影响 \t3.1.1 LET-607对线虫先天免疫的影响 \t3.1.2 LET-607对线虫抵抗外界压力的影响 \t3.1.3 秀丽隐杆线虫LET-607的细胞定位 \t3.2 LET-607通过DAF-16调控线虫抗压能力和寿命 \t3.2.1 LET-607对基因表达的影响 \t3.2.2 LET-607通过调节DAF-16入核来激活其功能 \t3.2.3 LET-607通过DAF-16调节抗压力 \t3.2.4 LET-607激活DAF-16有助于增加线虫寿命 \t3.2.5 已知的CREBH调控因子不参与LET-607对DAF-16的调控 \t3.3 LET-607调控线虫磷脂酰胆碱代谢 \t3.3.1 LET-607对线虫脂肪累积的影响 \t3.3.2 LET-607对线虫脂肪酸的影响 \t3.3.3 酸性鞘磷脂酶ASM-3不介导DAF-16激活 \t3.3 _4鞘磷脂合酶SMS-5介导DAF-16激活 \t3.3.5 磷脂酰胆碱介导DAF-16激活 \t3.3.6 LET-607调控磷脂酰胆碱代谢 \t3.3.7 PC介导生殖细胞缺失型突变体中的DAF-16激活 \t3.4 LET-607通过钙离子信号调控DAF-16 \t3.4.1 ITR-1钙离子通道对DAF-16激活的影响 \t3.4.2 钙离子流对DAF-16激活的影响 \t3.4.3 PKC-2和SGK-1参与LET-607介导的DAF-16激活 \t4 讨论 \t参考文献 \t附录 \tF.1 QPCR引物 \tF.2 ChIP-seq结果 \tF.3 病原菌感染实验统计结果 \tF.4 活性氧应激实验统计结果 \tF.5 热应激实验统计结果 \tF.6 内质网应激实验统计结果 \tF.7 寿命实验统计结果 |
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